大豆GmMYB46基因的克隆、定位及表达分析

• 作者: 赵晋铭 轩慧冬 邢邯 郭娜 马玲 黄颜众 黄鹭
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆 GmMYB46 保守结构域 亚细胞定位 逆境胁迫
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 植物科学
• 页码范围: 209-219
• 页数: 11页
• 分类号: S565.1
• 字数: 8168字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7685/jnau.201804050

摘要

[目的]本文旨在研究MYB类转录因子基因GmMYB46的结构特征和定位,并阐述其对不同胁迫的响应,为明确其在逆境胁迫下的作用奠定基础.[方法]从大豆品种‘晋豆21’中克隆出GmMYB46的CDS序列,采用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白进行分析,并利用PlantCARE软件分析GmMYB46基因启动子元件.通过洋葱表皮细胞瞬时表达系统对GmMYB46蛋白质全长及不同结构域M1 (aa1 ～ 123)和M2(aa124～334)进行亚细胞定位分析.采用实时荧光定量PCR检测GmMYB46在不同逆境处理下的表达情况.[结果]GmMYB46 CDS序列全长为1 005 bp,编码334个氨基酸,蛋白质相对分子质量为82.53×103,氨基酸序列中含有2个高度保守的SANT结构域.进化树分析表明该基因编码的蛋白与野生大豆GsMYB46亲缘关系最近.GmMYB46包含MBS、ABRE、GARE、TCA、LTR等逆境胁迫应答元件.亚细胞定位结果显示,pBIN-GmMYB46-GFP及pBIN-GmMYB46M1-GFP融合蛋白在细胞核中表达,pBIN-GmMYB46M2-GFP绿色荧光遍布整个细胞.实时荧光定量PCR分析表明,在干旱、盐(200 mmol· L-1 NaCl)、低温(4℃)、ABA(200 μmol·L-1)、SA(500 μmol· L-1)、GA(100 μmol·L-1)处理下均能诱导GmMYB46基因在大豆根、茎、叶中的上调表达.[结论]GmMYB46基因的保守结构域对亚细胞定位起决定性作用,该基因可能参与大豆对非生物胁迫的响应.