硫喷妥钠通过MyD88/NF-κB信号通路抑制巨噬细胞在脂多糖诱导下的免疫反应

• 作者: 陈刚 何爱萍
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 硫喷妥钠 脂多糖 巨噬细胞 MyD88
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 149-154
• 页数: 6页
• 分类号: R392.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2021.02.005

摘要

目的:研究硫喷妥钠对巨噬细胞在脂多糖(LPS)刺激诱导下的免疫反应,并探讨其作用机制.方法:利用佛波酯(PMA)诱导人单核细胞系THP-1细胞分化为巨噬细胞,使用不同浓度的硫喷妥钠(0、7.5、15、30μmol/L)进行处理后,LPS刺激并活化巨噬细胞;RT-PCR及Western blot检测硫喷妥钠对活化后的巨噬细胞中MyD88 mRNA及蛋白表达的影响;将抑制MyD88表达的si-MyD88转染入巨噬细胞,流式细胞术及ELISA分别检测硫喷妥钠对转染前后的巨噬细胞表面CD80及其对炎症因子IL-6、TNF-α、IL-10表达的影响;Western blot检测硫喷妥钠对巨噬细胞NF-κB信号通路中p65蛋白磷酸化的影响.结果:PMA成功诱导人单核细胞系THP-1细胞分化成为巨噬细胞;流式细胞术及ELISA实验结果显示,硫喷妥钠能够明显抑制LPS刺激活化的THP-1巨噬细胞表面CD80的表达及其对炎症因子IL-6、TNF-α、IL-10的释放;RT-PCR及Western blot实验结果显示,硫喷妥钠能够下调LPS刺激诱导下的THP-1巨噬细胞中MyD88 mRNA及蛋白质的表达;THP-1巨噬细胞转染si-MyD88后,RT-PCR及Western blot结果显示,细胞中MyD88 mRNA及蛋白质的表达均明显下降,流式细胞术及ELISA实验结果显示,LPS刺激诱导下的THP-1巨噬细胞表面CD80的表达及IL-6、TNF-α、IL-10的释放被显著抑制;Western blot实验结果显示,硫喷妥钠能够显著抑制NF-κB信号通路中p65蛋白磷酸化.结论:硫喷妥钠能够抑制巨噬细胞在LPS诱导下的免疫反应,其作用机制可能与降低细胞中MyD88/NF-κB信号通路激活水平有关.