左归丸对去势骨质疏松模型大鼠Wnt/β-catenin信号通路的影响

• 作者: 李耀洋 尚立芝 孙河龙 毛梦迪 闫鸿豪 周春雨 张光远 孙之蕊 王振阳
• 来源期刊: 中国实验方剂学杂志
• 关键词: 左归丸 绝经后骨质疏松症(PMOP) Wnt/β-链蛋白信号通路 糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β) 低密度脂蛋白相关受体蛋白5(LRP5) 骨代谢
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 经典名方
• 页码范围: 15-22
• 页数: 8页
• 分类号: R2-0|R289|R274
• 语种: 中文
• DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210539

摘要

目的:观察左归丸对去势骨质疏松大鼠模型骨代谢和W n t/β-链蛋白(β-catenin)信号通路的影响,探讨左归丸防治骨质疏松症的分子生物学机制.方法 :采用双侧卵巢切除法制备绝经后骨质疏松症大鼠模型,60 只雌性SD 大鼠随机分为假手术组,模型组,雌二醇组(戊酸雌二醇片0.05mg·kg-1·d-1),左归丸低、中、高剂量组(5.5,11,22 g·kg-1,d-1).从造模成功后(第13 周)开始,每日灌胃(ig)1 次,共持续12周.给药结束后,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠股骨组织结构变化;双能X射线仪检测各组大鼠股骨骨密度(BMD)和骨矿质(BMC);MTS Acumen3型生物力学测试系统检测各组大鼠骨生物力学性能;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中骨碱性磷酸酶(BALP),骨钙素(BGP),抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP),I 型前胶原氨基端前肽(PINP)等骨代谢标志物含量及雌二醇(E2)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠胫骨组织中Wnt2,β-catenin,低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)水平及糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)磷酸化水平.结果 :与假手术组比较,模型组大鼠BMD,BMC,最大载荷和刚度显著降低(P<0.01),血清E2和PINP含量显著降低(P<0.01),BALP,BGP,TRAP含量显著升高(P<0.01),骨组织中Wnt2,p-GSK-3βSer9,LRP5和β-catenin蛋白表达水平显著降低(P<0.01),股骨骨小梁稀疏变细,数量减少;与模型组比较,雌二醇组和左归丸各组BMD,BMC,最大载荷和刚度明显升高(P<0.05,P<0.01),血清E2和PINP含量明显升高(P<0.05,P<0.01),BALP,BGP,TRAP含量显著降低(P<0.01),骨组织中 Wnt2,p-GSK-3β Ser9,LRP5,β-catenin蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),股骨骨小梁较模型组变粗,数量增加,结构基本清晰.结论 :左归丸对去势大鼠骨质疏松症具有一定的防治作用,其机制可能与提高雌激素水平,激活Wnt/β-catenin信号通路,上调Wnt2和LRP5蛋白表达,抑制GSK-3β的活性,减少β-catenin 的降解,协调骨形成与骨吸收的动态耦联平衡,纠正骨代谢紊乱,从而改善骨组织形态相关.