SARS-CoV-2 Spike蛋白诱导人肾上皮细胞周期阻滞及细胞凋亡

• 作者: 梁文翰 毛莹莹 贾敏 胡志明 李金龙 李红卫
• 来源期刊: 暨南大学学报（自然科学与医学版）
• 关键词: SARS-CoV-2 自噬 凋亡 细胞周期阻滞
• 年，卷（期）: 2021,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 357-366
• 页数: 10页
• 分类号: Q291
• 语种: 中文
• DOI: 10.11778/j.jdxb.2021.04.003

摘要

目的:初步探讨慢病毒载体介导的SARS-CoV-2 Spike蛋白(简称S蛋白)过表达对人肾上皮细胞生长的影响及相关机制.方法:构建S蛋白慢病毒的表达载体pLV-CMV-S-IRES-eGFP,并将此载体包装成慢病毒颗粒(LV-S).利用重组的慢病毒LV-S感染人肾小管上皮细胞(HK-2)及HEK293T细胞(293T),利用EdU测定其细胞活力,利用流式细胞术测定其细胞周期和细胞凋亡,并通过Western blot检测相关蛋白表达水平.结果:重组慢病毒载体感染HK-2及293T细胞24 h均能观察到eGFP表达,细胞活力检测结果显示S蛋白过表达可以使HK-2及293T细胞的细胞活力下降.流式细胞术结果显示S蛋白诱导细胞周期阻滞在G2/M期,同时S蛋白通过激活Caspase-3和Caspase-9诱导细胞发生凋亡.此外,SARS-CoV-2 S蛋白过表达可以增强HK-2及293T细胞自噬相关蛋白的表达.结论:SARS-CoV-2 S蛋白可能通过诱导肾上皮细胞发生周期阻滞和凋亡,介导细胞损伤.