氟对成骨细胞Saos-2 DNA甲基化的影响

• 作者: 秦纹 马红 张美林 陈龙 张美玉 钟近洁
• 来源期刊: 新疆医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 氟化钠 成骨细胞 DNA甲基化
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 49-54
• 页数: 6页
• 分类号: R599
• 语种: 中文
• DOI: 10.3639/j.issn.1009-5551.2021.01.010

摘要

目的 观察氟化钠(NaF)对成骨细胞的毒性效应,及在毒性作用过程中对DNA甲基化效应的影响.方法 0、2.5、5、10、20、40 mg/LNaF分别干预骨肉瘤细胞(Saos-2)24、48、72、96 h后,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞的增殖活力;流式细胞仪法检测72 h细胞的增殖活力;基因芯片检测细胞的DNA甲基化程度;实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测染氟成骨细胞DNMTl、Runx2、Osterix基因mRNA的表达情况.结果 MTT实验中染氟72、96h时,5 mg/L的NaF对成骨细胞Saos-2的增殖活力较0 mg/L组有明显的促进作用(P<0.05);≥72 h时,20 mg/L的NaF对成骨细胞Saos-2的增殖活力较0 mg/L组有明显的抑制作用(P<0.05),且随着NaF剂量的增大和时间的延长对细胞增殖活力的抑制逐渐增强.流式细胞仪实验中2.5、5 mg/L的NaF对成骨细胞Saos-2的增殖活力较0 mg/L组有明显的促进作用(P<0.05);≥20 mg/L的NaF较0 mg/L组明显抑制成骨的增殖作用.5 mg/L的NaF作用成骨细胞Saos-2后DNA甲基化程度较0 mg/L组明显的降低(P<0.05);≥20 mg/L的NaF作用成骨细胞Saos-2后DNA甲基化程度较0 mg/L组明显的增高.5 mg/L的NaF作用成骨细胞Saos-2后DN-MT1的表达量较0 mg/L组明显降低,Runx2、Osterix的表达量较0 mg/L组明显的增高(P<0.05);≥20 mg/L的NaF作用成骨细胞Saos-2后DNMT1的表达量较0 mg/L组明显升高,Runx2、Osterix的表达量较0 mg/L组明显的降低.结论 低剂量的氟对Saos-2的增殖有明显的促进作用,高剂量的氟对Saos-2的增殖有明显的抑制作用,且随着剂量的增大和时间的延长对细胞增殖活力的抑制逐渐增强.低剂量的氟可能抑制DNMT1的表达,降低Saos-2的甲基化程度,一定程度上促进了骨基因Runx2、Osterix的表达.高剂量的氟可能促进DNMT1的表达,增高Saos-2的甲基化程度,一定程度上抑制骨基因Runx2、Osterix的表达.