HOTAIRM1靶向miR-433对MPP+诱导的SK-N-SH细胞损伤的影响

• 作者: 杨庆华 杨隆良 杨晓莉
• 来源期刊: 卒中与神经疾病
• 关键词: 同源异型盒A转录本反义RNA1 miR-433 1-甲基-4-苯基吡啶离子 细胞凋亡 氧化应激
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 274-281
• 页数: 8页
• 分类号: R742.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-0478.2021.03.005

摘要

目的 探讨同源异型盒A转录本反义RNA1(Homeobox A transcript antisense RNA myeloid-specific 1,HOTAIRM1)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-Methyl-4-phenylpyridine,MPP+)诱导的SK-N-SH细胞损伤的影响及作用机制.方法 体外培养SK-N-SH细胞,分为对照组(Con组)、Model组、乱序无意义阴性序列(Out-of-order nonsense negative sequence,si-NC)组、HOTAIRM1小干扰RNA(HOTAIRM1 small in-terfering RNA,si-HOTAIRM1)组、si-HOTAIRM1+抑制剂阴性序列(Inhibitor negative sequence,anti-miR-NC)组和si-HOTAIRM1+miR-433抑制剂(MiR-433 inhibitor,anti-miR-433)组;流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡;Western Blot检测兔抗人B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)蛋白表达水平;试剂盒检测丙二醛(Malonaldehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)水平;实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测HOTAIRM1和微小RNA-433(microRNA-433,miR-433)表达水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-433与HOTAIRM1靶向关系.结果 与Con组比较,Model组SK-N-SH细胞的细胞周期G0-G1期延长(P<0.05),S期缩短(P<0.05),细胞凋亡率、Bax蛋白、MDA和OTAIRM1表达水平升高(P<0.05),Bcl-2蛋白、GSH-Px和SOD活性及miR-433表达水平降低(P<0.05);与Model组比较,si-HOTAIRM1组SK-N-SH细胞的细胞周期G0-G1期缩短(P<0.05),S期延长(P<0.05),细胞凋亡率、Bax蛋白、MDA和OTAIRM1表达水平降低(P<0.05),Bcl-2蛋白、GSH-Px和SOD活性及miR-433表达水平升高(P<0.05);与si-HOTAIRM1+anti-miR-NC组比较,si-HOTAIRM1+anti-miR-433组SK-N-SH细胞的细胞周期G0-G1期延长(P<0.05),S期缩短(P<0.05),细胞凋亡率、Bax蛋白和MDA水平升高(P<0.05),Bcl-2蛋白、GSH-Px水平和SOD活性降低(P<0.05);Model组与si-NC组、si-HOTAIRM1组与si-HOTAIRM1+anti-miR-NC组各检测指标水平比较均无显著差异(P>0.05).HOTAIRM1可与miR-433靶向结合.结论 下调HOTAIRM1可靶向上调miR-433表达来抑制MPP+诱导的SK-N-SH细胞氧化应激和凋亡,进而减轻细胞损伤.