血管紧张素Ⅱ/乳脂肪球表皮生长因子8信号通路调控人脐静脉内皮细胞基质重构的作用及分子机制

• 作者: 倪冷 狄潇 张锐 马百涛 刘昌伟 郑曰宏
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 脐静脉内皮细胞 血管紧张素Ⅱ 表皮生长因子8
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 53-56
• 页数: 4页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn421213-20201012-00746

摘要

目的:探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)/乳脂肪球表皮生长因子8(MFG-E8)信号通路在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)基质重构调控中的分子生物学机制。方法:利用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)实验对AngⅡ和MFG-E8浓度进行筛选，根据实验需求在AngⅡ和MFG-E8浓度筛选实验中分为5组，阴性对照组(DPBS)、AngII 0.1 μmol/L、AngII 1.0 μmol/L、MFG-E8 50.0 μg/L、MFG-E8 100.0 μg/L。并利用RT-qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测AngⅡ和MFG-E8的相互作用关系及对下游基因单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。两组间比较采用 t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK- q检验。 结果:在脐静脉内皮细胞中，1 μmol/L的AngⅡ或100 μg/L MFG-E8能够促进AngⅡ mRNA的表达(1.62±0.30、2.25±0.36比1.00±0.00， t＝3.606、6.015， P<0.05)，差异有统计学意义。0.1 μmol/L或1.0 μmol/L的AngⅡ(1.27±0.11、1.58±0.14比1.00±0.00， t＝4.320、6.887， P<0.05)，以及50.0 μg/L或100.0 μg/L的MFG-E8能够促进MFG-E8的表达(1.90±0.09、2.77±0.07比1.00±0.00， t＝17.240、43.130， P<0.05)，差异有统计学意义。通过AngⅡ刺激HUVECs细胞建立血管高压模型，结果显示，AngⅡ能够显著促进HUVECs内AngⅡ、MFG-E8以及TGF-β1 mRNA的表达(1.62±0.13、4.27±0.47、1.56±0.11比1.00±0.00， t＝7.911、12.060、8.710， P<0.01)，而AngⅡ受体拮抗剂洛沙钽能抑制AngⅡ的作用，AngⅡ与MFG-E8共处理，则能进一步促进AngⅡ的作用(1.86±0.21比1.00±0.00， t＝7.023， P<0.01)，显著协同促进MCP-1和MMP-2 mRNA的表达(1.69±0.25、1.69±0.15比1.00±0.00， t＝4.735、7.845， P<0.01)，差异均有统计学意义。此外，AngⅡ能够显著促进MFG-E8蛋白水平的表达(0.23±0.01比0.16±0.03， t＝3.895， P<0.05)，而洛沙钽能抑制AngⅡ对MFG-E8蛋白表达的促进作用，AngⅡ与MFG-E8共处理，则能够进一步促进AngⅡ对MFG-E8(0.22±0.03比0.16±0.03， t＝2.493， P<0.05)和TGF-β1蛋白水平表达的促进作用(0.66±0.06比0.50±0.03， t＝3.870， P<0.01)，差异均有统计学意义。 结论:AngⅡ能够促进MFG-E8的表达，而MFG-E8也能够促进AngⅡ的表达，AngⅡ/MFG-E8信号通路能够促进基质重构标志物MCP-1、MMP-2和TGF-β1的表达。