大气颗粒物急性暴露对C57BL/6小鼠肺脏病理改变和气道上皮细胞IL-6和IL-8表达的影响

• 作者: 王强 董年
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 颗粒物 支气管上皮细胞 白细胞介素6 白细胞介素8 PI3K信号通路
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 短篇论著
• 页码范围: 128-133
• 页数: 6页
• 分类号: R329.28|R114
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2021.01.019

摘要

目的:探讨大气颗粒物(PM)急性暴露下C57BL/6小鼠肺脏的病理改变和气道上皮细胞炎症介质白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素8(IL-8)分泌的分子机制.方法:选取雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组和PM实验组,每组10只:PM实验组连续2 d经气管滴注PM悬浮液,建立PM短期暴露的小鼠模型;空白对照组连续2 d经气管滴注PBS.获取肺组织进行HE染色和PAS染色以评估组织病理变化;获取支气管肺泡灌洗液(BALF),检测IL-6和IL-8的表达.建立PM刺激人气道上皮细胞的体外细胞模型:200 mg/L的PM刺激BEAS-2B细胞,于3、6、12和24 h时点检测IL-6和IL-8的mRNA表达;25、50、100、200和400 mg/L的PM刺激BEAS-2B细胞24 h,检测IL-6和IL-8蛋白的分泌;200 mg/L的PM刺激BESA-2B细胞5、10和15 min,检测PI3K信号通路相关蛋白的变化;预先给予5μmol/L PI3K抑制剂LY294002干预0.5 h,再用200 mg/L的PM刺激BESA-2B细胞15 min,检测PI3K信号通路相关蛋白的变化.结果:在体内动物模型中,与空白对照组相比,PM组小鼠气道周围可见炎症细胞浸润,气道上皮细胞变厚,BALF中IL-6和IL-8显著升高(P<0.01).在体外细胞模型中,与空白对照组相比,PM刺激可引起BEAS-2B细胞中IL-6和IL-8的mRNA表达和蛋白分泌(P<0.01),同时能显著提高PI3K信号通路的磷酸化水平(P<0.01),PI3K抑制剂LY294002能部分逆转PM诱导的PI3K信号通路的磷酸化(P<0.05),同时显著逆转PM诱导的IL-6和IL-8蛋白分泌(P<0.01).结论:本研究的动物实验揭示了PM急性暴露下C57BL/6小鼠肺脏以气道炎症为主的病理改变,体外细胞实验揭示PI3K信号通路介导了PM诱导的气道上皮细胞IL-6和IL-8分泌.