6株高致病性H5N6禽流感病毒的分离鉴定和遗传进化分析

• 作者: 常娜娜 张倩 张成 杜菲 阿木提喀日·马木提 毕玉海 马正海
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 禽流感病毒 H5N6 活禽市场 遗传进化
• 年，卷（期）: 2021,（4）
• 所属期刊栏目: 禽流感病毒
• 页码范围: 254-261
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn112309-20210124-00036

摘要

目的:对活禽市场家禽中分离的H5N6禽流感病毒(avian influenza virus, AIVs)进行遗传进化和分子特征分析。方法:2018年12月于乌鲁木齐市活禽市场采集家禽双腔拭子和环境样本，通过接种鸡胚、血凝试验和RT-PCR等方法分离鉴定AIVs，以甲型流感病毒通用引物扩增病毒全基因组并测序，利用BLAST、Clustal W、MEGA-X和DNAStar等软件进行序列比对、系统进化和分子特征分析。结果:从家禽样品中分离到6株H5N6亚型AIVs，其各基因之间的一致性较高(99.4%～100.0%)，为同一来源。BLAST分析显示除 NP基因与苏州家禽中分离的H5N6毒株一致性最高(99.7%)，其余7个基因片段均与2017—2018年广东环境中分离的H5N6毒株一致性最高，在99.0%～100.0%之间。遗传进化分析显示分离株的 HA属于Clade2.3.4.4.C分支， HA、 NA、 PB1、 PA、 NP、 MP这6个基因均与2018年自华东地区水貂中分离的H5N6病毒株聚在同一分支， PB2和 NS均与2017—2018年于广东环境中分离的H5N6病毒株聚在一起。分离株HA的裂解位点含多个连续的碱性氨基酸，为高致病性AIV， HA的S137A和T160A突变可增强病毒与人源受体SAα2，6-Gal的结合。另外， NA茎部缺失、 PB2的L89V、G309D、R477G、I495V、I504V、D391E和A661E以及 NS1的P42S、D92E和80～84位氨基酸缺失等突变均可增强病毒对哺乳动物的毒力和致病力。 结论:分离的6株高致病性H5N6 AIVs与2017—2018年分离自华东地区水貂和广东环境的H5N6 AIVs的遗传关系较近，存在的多个突变可增强病毒对哺乳动物的致病性，存在较大的公共卫生风险。