miR-3605-5p通过调控TRPV4表达对肾细胞癌A498细胞侵袭和增殖的影响

• 作者: 蔡亮 李超 张林 朱保平
• 来源期刊: 武汉大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 肾细胞癌 微小RNA 瞬时感受器电位离子通道香草素受体4 细胞侵袭 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 272-276
• 页数: 5页
• 分类号: R737.11
• 语种: 中文
• DOI: 10.14188/j.1671-8852.2019.0781

摘要

目的:观察微小RNA(miRNA,miR)-3605-5p通过调控瞬时感受器电位离子通道香草素受体4(TRPV4)基因表达对肾细胞癌A498细胞侵袭和增殖的影响.方法:实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾细胞癌细胞系(A498、CaKi-1、786-O、ACHN)和永生化近端肾小管上皮细胞(HK-2)中miR-3605-5p的表达.将miR-3605-5p表达最少的肾细胞癌细胞系随机分为2组:miR-NC组(转染miR-NC)和miR-3605-5p组(转染miR-3605-5p).qRT-PCR检测转染效果.Transwell实验和细胞计数试剂盒(CCK-8)检测两组肾细胞癌A498细胞侵袭和增殖水平.生物信息学软件预测和双荧光素酶报告实验验证miR-3605-5p的靶基因.qRT-PCR和Western Blot检测2组肾细胞癌A498细胞中靶基因的表达.结果:miR-3605-5p在肾细胞癌细胞系的表达水平明显低于永生化近端肾小管上皮细胞(P＜0.05),在A498细胞中表达最少(P＜0.01).miR-3605-5p组A498细胞中miR-3605-5p的表达(9.49±1.09)高于miR-NC组(1.06±0.18),差异有统计学意义(P＜0.01).miR-NC组和miR-3605-5p组侵袭细胞数量分别为(125.70±14.05)个和(42.01±8.98)个,miR-3605-5p组A498细胞侵袭能力下降(P＜0.01).与miR-NC组比较,miR-3605-5p组A498细胞增殖能力降低(P＜0.05).生物信息学软件显示miR-3605-5p的靶基因是TRPV4.双荧光素酶报告实验证明miR-3605-5p可靶向结合TRPV4基因(P＜0.05).与miR-NC组比较,miR-3605-5p组A498细胞中TRPV4的表达降低(P＜0.05).结论:miR-3605-5p通过下调TRPV4基因表达抑制肾细胞癌细胞A498的侵袭和增殖能力,miR-3605-5p可能成为肾细胞癌的潜在治疗靶点.