冷冻电子显微镜观察人釉原蛋白的自组装

• 作者: 赖婷婷 陈亮 张川 田鲲
• 来源期刊: 实用口腔医学杂志
• 关键词: 冷冻电子显微镜 釉原蛋白 自组装
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 临床医学研究|Clinical Study
• 页码范围: 114-118
• 页数: 5页
• 分类号: R780.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-3733.2021.01.024

摘要

目的:采用冷冻电子显微镜(cryo TEM)体外观察人釉原蛋白的自组装过程,分析自组装各阶段蛋白的聚集状态及细微结构.方法:提取青少年下颌第三磨牙牙胚细胞总RNA,用RT-PCR获得人釉原蛋白基因全长,再与pMD19-T载体构建重组质粒,转入宿主菌E.coli Top10中诱导表达并纯化.冷冻电子显微镜观察pH值从3.5跃升至8.0时釉原蛋白发生自组装的聚合状态.结果:当pH值为8.0时在1～20 min内观察到釉原蛋白由低聚体逐步组装成多聚体、纳米球及纳米链等结构.结论:在适宜条件下,人釉原蛋白能分级组装成纳米球.