端粒酶活性检测试纸构建与肿瘤细胞可视化判定

• 作者: 张瑞雪 陈文静 姜玮 徐晓文
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: 端粒酶 检测试纸 肿瘤细胞 可视化分析
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告|Scientific Papers
• 页码范围: 702-709
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.19756/j.issn.0253-3820.201765

摘要

端粒酶是将端粒重复序列添加到染色体末端端粒上的核糖核蛋白,可补偿细胞分裂过程中的端粒缩短,维持细胞持续增殖.端粒酶活性在肿瘤细胞中过表达,在正常体细胞中被抑制,是癌症诊断和预后评估的重要标志物.本研究构建了一种检测试纸,用于可视化分析端粒酶活性和判定肿瘤细胞.将样品垫、喷涂DNA功能化金纳米粒子的结合垫、含有测试区和对照区的硝酸纤维素膜和吸收垫共同组装在底板上,构成检测试纸.在端粒酶的催化作用下,底物序列发生链延伸,然后被滴加在样品垫上.溶液依靠毛细作用在试纸上流动,水化结合垫上的DNA功能化金纳米粒子.在流动过程中,端粒酶延伸产物、测试区中捕获的DNA、金纳米粒子上修饰的DNA杂交形成三明治式结构,使金纳米粒子富集在测试区,T线显示红色.同时,DNA功能化金纳米粒子继续流动,与对照区中捕获DNA杂交,C线显示红色,以验证试纸的有效性.通过响应细胞裂解液中的端粒酶,本方法可通过观察T线显色的方式对肿瘤细胞和正常细胞进行简便、快速的可视化区分.