摘要:
目的 葡萄糖转运蛋白-1(Glut-1)短发夹RNA(shRNA)及诱导自噬是否可以影响喉癌HEp-2细胞生长、迁移.方法 构建Glut-1 shRNA稳转株(HEp-2细胞),分为Control组、阴性对照(NC)组、Glut-1 shRNA组、NC+雷帕霉素(RAP)组、Glut-1 shRNA+RAP组、NC+过表达(Lenti)-Beclin1组、Glut-1 shRNA+Lenti-Beclin1组等七组;采用CCK-8、流式细胞仪、Transwell实验分别检测Glut-1 shRNA、自噬诱导剂RAP、Beclin-1过表达载体对喉癌HEp-2细胞增殖、凋亡、迁移的影响.结果 CCK-8结果显示:72 h后,与NC组比较,Glut-1 shRNA组、NC+RAP组和NC+Lenti-Beclin1组的细胞均明显减少(t分别=26.00、24.74、27.57,P均<0.05);与Glut-1 shRNA组比较,Glut-1 shRNA+RAP组、Glut-1 shRNA+Lenti-Beclin1组的细胞均明显减少(t分别=12.60、14.99,P均<0.05);与NC+RAP组比较,Glut-1 shRNA+RAP组的细胞明显减少(t=9.85,P<0.05);与NC+Lenti-Beclin1组比较,Glut-1 shRNA+Lenti-Beclin1组的细胞明显减少(t=12.80,P<0.05).细胞流式检测显示:与NC组比较,Glut-1 shRNA组、NC+RAP组和NC+Lenti-Beclin1组细胞凋亡率明显增多(t分别=10.12、8.89、8.51,P均<0.05).与Glut-1 shRNA组比较,Glut-1 shRNA+RAP组、Glut-1 shRNA+Lenti-Beclin1组细胞凋亡率明显增多(t分别=21.01、28.13,P均<0.05).与NC+RAP组比较,Glut-1 shRNA+RAP组的细胞凋亡率明显增多(t=15.67,P<0.05).与NC+Lenti-Beclin1组比较,Glut-1 shRNA+Lenti-Beclin1组的细胞凋亡率明显增多(t=18.78,P<0.05).Transwell实验结果显示:与Glut-1 shRNA组比较,Glut-1 shRNA+RAP组、Glut-1 shRNA+Lenti-Beclin1组细胞数明显减少(t分别=10.71、9.53,P均<0.05);与NC+RAP组比较,Glut-1 shRNA+RAP组的细胞数减少(t=11.31,P<0.05);与NC+Lenti-Beclin1组比较,Glut-1 shRNA+Lenti-Beclin1组的细胞数明显减少(t=11.73,P<0.05).结论 Glut-1 shRNA及诱导自噬可以抑制HEp-2细胞的增殖、促进凋亡、降低迁移.