斑马鱼tbx2b调控心脏房室间隔发育的功能研究

• 作者: 赵霞 朱哲 祖尧
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 关键词: tbx2b 心脏发育 房室间隔 CRISPR
• 年，卷（期）: 2021,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: Q812
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.2103060

摘要

tbx2是早期心脏发育的关键基因.为进一步探究其对房室间隔(AVC)发育的影响,研究利用CRISPR/Cas9介导的基因敲除技术,成功构建了斑马鱼tbx2b突变体.通过T7E1酶切对其Fo进行敲除效率检测,结果显示平均敲除效率约为57.5％.F1进一步筛选获得tbx2b杂合突变体,测序结果显示突变类型为11 bp碱基缺失的移码突变.tbx2b杂合子内交获得纯合子,tbx2b纯合突变体在5 dpf死亡并出现早期心脏环化异常表型.斑马鱼整胚原位杂交实验显示在3 dpf tbx2b纯合突变体中,心脏腔室分化特异性标志基因nppa、nppb表达上调并畀位表达在AVC,而AVC发育关键基因has2的表达消失.高效构建tbx2b突变体并初探其对下游基因的影响,为后续深入研究tbx2b对心脏AVC发育的作用奠定了基础,同时加深了人们对早期心脏调控网络的认识.