Nested-PCR在人间布鲁氏菌病早期快速诊断中的探讨

• 作者: 刘志国 王妙 塔娜 李晓燕 尉瑞平 米景川 李丹 崔步云 李振军
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 关键词: 布病 Nested-PCR 早期诊断
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 疾病防治|Diseases Control and Prevention
• 页码范围: 188-192
• 页数: 5页
• 分类号: R378.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2021.00.002

摘要

目的 探讨Nested-PCR在布鲁氏菌病(布病)患者早期快速诊断中的可行性.方法 用Nested-PCR对布鲁氏菌标准菌株的19生物型、4个疫苗株(M5、A19、S2和104M)和有血清交叉反应的菌株(人苍白杆菌、大肠杆菌O∶157、小肠结肠炎耶尔森氏菌O∶9)进行扩增,评价该方法的特异性;用Nested-PCR对倍比稀释的16M菌株DNA(100～10-7)进行扩增,评价该方法的分析敏感性.用Nested-PCR对临床采集的200份布病样本DNA进行检测,评价该方法在临床样本检测中的可行性.结果 Nested-PCR能特异性的检出所有布鲁氏菌种,而与布鲁氏菌有血清学交叉反应的菌株和阴性对照未见扩增.试验表明该方法的分析敏感性至少为10-6(相当于43 fg/μL羊种布鲁氏菌DNA),明显高于BCSP31-PCR.该方法首轮引物的扩增阳性率为4.5％ (9/200),次轮引物扩增的阳性率为75.5％ (151/200),与血清学检测结果有较高的一致性.结论 Nested-PCR可尝试用于布病患者的早期筛查,但尚需优化改进.