吴茱萸碱联合自噬抑制剂氯喹抗肝癌作用的研究

• 作者: 沈星星 时乐 姚亮宇 牛玉珍 梁涛
• 来源期刊: 南京中医药大学学报
• 关键词: 吴茱萸碱 氯喹 HepG2细胞 自噬 血管生成
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 400-403
• 页数: 4页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.14148/j.issn.1672-0482.2021.0400

摘要

目的 研究吴茱萸碱(EVO)联合自噬抑制剂氯喹(CQ)的抗肝癌作用.方法 用CCK8法检测EVO及EVO联合CQ对HepG2细胞活性的影响,Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)/微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ(LC3-Ⅰ)(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)、P62、血管内皮生长因子(VEGFA)蛋白表达,ELISA法检测HepG2细胞上清液中VEGFA的表达水平,细胞侵袭实验检测条件培养液对人脐静脉血管细胞HUVECs侵袭能力的影响.结果 不同浓度的EVO在作用24 h后能明显抑制HepG2细胞的活性且呈剂量依赖性,当EVO与CQ联合使用时其抑制细胞活性能力更强(P<0.01).Western blot结果显示EVO能上调LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的表达(P<0.05),降低P62的表达(P<0.05),对VEGFA的表达没有明显作用,但有下降的趋势.丹酰戊二胺(MDC)染色结果显示EVO能促进HepG2细胞自噬小体增加,EVO+CQ组细胞内自噬小体聚集明显增多.ELISA结果显示EVO能降低VEGFA的表达(P<0.01),并且EVO联合CQ作用效果更加明显(P<0.01).HU-VECs侵袭实验表明,EVO能有效抑制HUVECs细胞侵袭(P<0.01),同时EVO联合CQ抑制HUVECs细胞侵袭能力更为显著(P<0.01).结论 EVO能抑制HepG2细胞活性,并且能提高其自噬水平,降低血管生成能力.EVO与自噬抑制剂CQ联合使用时,对HepG2细胞活性和血管生成的抑制作用更为显著.