淡色库蚊表皮蛋白CpCPR117基因克隆及表达分析

• 作者: 王洋 刘宏美 郭秀霞 宋晓 王海洋 程鹏 王海防 王怀位 公茂庆
• 来源期刊: 中国媒介生物学及控制杂志
• 关键词: 淡色库蚊 表皮蛋白 龄期 基因表达
• 年，卷（期）: 2021,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究|Experimental Study
• 页码范围: 436-440
• 页数: 5页
• 分类号: R384.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.11853/j.issn.1003.8280.2021.04.010

摘要

目的 克隆淡色库蚊表皮蛋白CpCPR117基因,分析其不同发育阶段的表达模式,为探索其抗药性功能奠定基础.方法 利用同源克隆从淡色库蚊Ⅲ龄末Ⅳ龄初幼虫中克隆CpCPR117基因编码区序列,并用邻接法与其他昆虫同源序列构建系统发育树.利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测该基因在淡色库蚊敏感和氯氰菊酯抗性品系不同发育阶段(Ⅰ和Ⅱ龄幼虫、Ⅲ和Ⅳ龄幼虫、蛹、羽化3d成蚊)的表达情况.表达差异分析采用独立样本t检验.结果 克隆获得表皮蛋白CpCPR117基因,该基因全长459 bp,编码152个氨基酸,含有表皮蛋白CPR家族的RR-2基序.序列同源性比对和系统发育树分析显示,淡色库蚊与致倦库蚊同源蛋白亲缘关系最近,其氨基酸序列一致性为98.00％.RT-qPCR结果显示,CpCPR117在淡色库蚊敏感和抗性品系各龄期均有表达,并且在Ⅰ和Ⅱ龄幼虫、蛹期表达量的差异均有统计学意义(Ⅰ和Ⅱ龄幼虫:t=-17.177,P＜0.001;蛹期:t=-3.964,P=0.001).结论 CpCPR117基因在淡色库蚊敏感和抗性品系不同发育阶段的表达水平存在差异,为进一步探索其在淡色库蚊氯氰菊酯抗药性的功能机制奠定了基础.