淡色库蚊氨肽酶N基因的克隆及生物信息学分析

• 作者: 公茂庆 刘丽娟 张崇星 杨培培 王怀位 王海防 程鹏 郭秀霞
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 淡色库蚊 氨肽酶N 克隆 生物信息学
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 240-245
• 页数: 6页
• 分类号: Q969.44
• 字数: 3773字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2016.03.006

摘要

目的 克隆淡色库蚊Bt毒素受体氨肽酶N(Aminopeptidase N,APN)基因,并对基因及编码蛋白进行生物信息学分析.方法 提取淡色库蚊RNA,通过RT-PCR扩增氨肽酶N基因的全长cDNA序列,纯化PCR产物连接至pMD19-T载体,阳性重组质粒经PCR鉴定后进行基因测序.生物信息学分析APN基因的序列同源性及编码蛋白的结构特征.结果 该基因cDNA序列全长为1 383 bp(含终止密码子),编码460个氨基酸,与致倦库蚊XM_001862270.1序列的同源性为100％.预测蛋白质分子量为52.9 kDa,等电点为4.98.前21个氨基酸为N-末端的信号肽,存在2个N-糖基化位点(93 NLT95和169 NVS171).具有肽酶家族M1的序列特征、锌结合位点HEXXH和谷氨酸锌化氨肽酶的保守结构GAMEN.结论 成功克隆了淡色库蚊氨肽酶N基因并对APN蛋白进行生物信息学分析,为进一步探讨淡色库蚊APN的功能及Bt毒素作用机制奠定了基础.