TLR3活化对人脂肪间充质干细胞成骨分化的影响

• 作者: 金兵男 江鑫铭 李霄霞 赵春华
• 来源期刊: 青岛大学学报（医学版）
• 关键词: 间质干细胞 脂肪组织 Toll样受体3 成骨分化
• 年，卷（期）: 2021,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 475-480
• 页数: 6页
• 分类号: R329.21
• 语种: 中文
• DOI: 10.11712/jms.2096-5532.2021.57.040

摘要

目的 探讨Poly(I:C)活化人脂肪间充质干细胞(hAMSCs)Toll样受体3(TLR3)后对hAMSCs成骨分化的影响.方法 胶原酶消化法分离提取hAMSCs,对其细胞形态、免疫学表型和成骨分化能力进行鉴定.将原代分离培养的hAMSCs随机分为对照组和TLR3组,对照组不做处理,TLR3组用含有20 mg/L Poly(I:C)的正常培养基处理6 h活化TLR3.CCK8法检测两组hAMSCs增殖能力变化,Real-time PCR方法检测hAMSCs成骨标志基因runt相关转录因子2(RUNX2)和骨钙素(OCN)mRNA表达,Western Blot方法检测RUNX2和OCN蛋白及NF-κB通路相关蛋白p-P65、P65表达.对照组和TLR3组均用间充质干细胞成骨诱导培养基诱导分化,12 d后用茜素红染色法检测两组hAMSCs成骨诱导后钙质沉积情况.结果 对照组和TLR3组hAMSCs的增殖能力差异无显著性(P>0.05).TLR3组hAMSCs成骨标志基因RUNX2及OCN的mRNA和蛋白表达均高于对照组(t=2.98～36.36,P<0.05),NF-κB通路相关蛋白P65及p-P65表达也高于对照组(t=3.52、13.85,P<0.05).茜素红染色结果显示,成骨诱导12 d后TLR3组钙质沉积程度高于对照组.结论 TLR3活化能够通过激活NF-κB通路促进hAMSCs成骨分化.