敲除Vanin-1促进肾缺血再灌注损伤后功能恢复的作用及机制

• 作者: 王玲 汪晓月 封蕾 王梨名 罗佳 陈佳 陈客宏
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 关键词: 血管非炎症分子1 再灌注损伤 肾小管细胞 转化生长因子β 肾脏功能恢复 小鼠,基因敲除
• 年，卷（期）: 2021,（7）
• 所属期刊栏目: 基础科学|Basic Medicine
• 页码范围: 593-598
• 页数: 6页
• 分类号: R363.21|R364.12|R692
• 语种: 中文
• DOI: 10.16016/j.1000-5404.202009162

摘要

目的 探讨血管非炎症分子1(vascular noninflammatory molecule-1,Vanin-1)在缺血再灌注损伤后肾组织的表达水平及其与肾脏功能恢复的关系.方法 选取8周龄BALB/c野生型、Vanin-1基因敲除雄鼠,采用完全随机法分为假手术组、缺血再灌注组、敲除组、敲除+缺血再灌注组,每组6只.缺血再灌注组、敲除+缺血再灌注组分离双侧肾蒂后夹闭35 min,后松开夹闭,恢复血流;假手术组、敲除组仅暴露肾蒂,不夹闭.术后0、3、14d,留取血清、尿液、肾组织标本,检测血清肌酐、尿素氮水平,检测尿液TGF-β水平,PAS染色明确肾组织损伤严重程度,免疫组化检测肾组织Vanin-1表达水平.提取野生型和Vanin-1基因敲除鼠原代肾小管上皮细胞,传代至第2代,设置对照组、对照+损伤组、敲除组、敲除+损伤组,损伤条件为缺氧(1％O2,94％N2,5％CO2,48 h)、复氧(5％CO2,95％空气,24 h),模拟体内缺血再灌注损伤模型,收取肾小管上皮细胞和上清,检测Vanin-1蛋白和上清中TGF-β表达水平.结果缺血再灌注损伤后第3天,与假手术组相比,缺血再灌注组、敲除+缺血再灌注组血清肌酐、尿素氮水平明显升高(P＜0.05),PAS染色提示肾组织损伤明显;但缺血再灌注组与敲除+缺血再灌注组小鼠比较,血清肌酐、尿素氮水平无明显差异,PAS染色提示两组肾组织损伤无明显差异.缺血再灌注后第14天,该两组血清肌野、尿素氮、PAS肾组织损伤均比缺血再灌注后第3天显著恢复,敲除+缺血再灌注组的恢复速度均明显快于缺血再灌注组,PAS肾组织慢性化改变明显轻于缺血再灌注组(P＜0.05),且敲除+缺血再灌注组尿中TGF-β水平明显低于缺血再灌注组(P＜0.05).免疫组化结果提示:损伤后第14天,肾组织 Vanin-1表达明显升高(P＜0.01),且主要表达于受损肾小管上皮细胞.细胞实验结果显示:予以缺氧-复氧损伤后,对照+损伤组肾小管上皮细胞Vanin-1蛋白表达明显升高(P＜0.01),上清中TGF-β 水平明显高于敲除+损伤组(P＜0.05).结论Vanin-1可促进缺血再灌注损伤后肾小管上皮细胞TGF-β分泌,延缓肾脏功能恢复,促进急性肾损伤向慢性肾脏病进展.