干扰GTPBP4基因对食管癌EC9706细胞放射敏感性影响

• 作者: 张翠红 吕欣 范才 马博敬 张燚 张建军
• 来源期刊: 中华放射肿瘤学杂志
• 关键词: GTPBP4基因 RNA干扰 放射敏感性 EC9706细胞系
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 物理·技术·生物
• 页码范围: 509-513
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn113030-20200714-00362

摘要

目的:探讨沉默GTPBP4基因对人食管癌EC9706细胞系放射敏感性影响。方法:通过GEO数据库分析食管癌患者组织中GTPBP4的表达情况。利用重组质粒载体介导的RNA干扰(RNAi)技术转染食管癌EC9706细胞系，使细胞中GTPBP4基因沉默，观察GTPBP4基因沉默对EC9706细胞增殖、凋亡及放射敏感性影响。通过qRT-PCR和蛋白质印迹法评估基因沉默效果及检测凋亡相关蛋白表达。应用MTT法检测转染后细胞的增殖变化。采用流式细胞术检测干扰GTPBP4基因表达后细胞凋亡变化。应用克隆形成实验检测细胞照射后放射敏感性变化。结果:GEO数据库分析表明GTPBP4基因在人食管癌组织中的表达明显高于正常邻近食管组织( P<0.001)。与空白对照组和阴性对照组相比，干扰组EC9706细胞的GTPBP4 mRNA及蛋白表达水平明显下降(均 P<0.001)，表明质粒成功转染EC9706细胞。MTT检测结果显示干扰组EC9706细胞增殖率受到显著抑制( P<0.001)。流式细胞术结果显示干扰组EC9706细胞凋亡率明显升高( P<0.001)，细胞凋亡明显增加( P<0.001)；凋亡相关蛋白(Cleaved caspase-9、Cleaved caspase-3、Bax)表达明显升高，抗凋亡蛋白(Bcl-2)表达下降( P<0.001、 P＝0.001、 P＝0.0014、 P＝0.005)。克隆形成实验结果显示干扰组EC9706细胞放射增敏比1.716。 结论:GTPBP4基因在人食管癌组织中高表达，RNAi技术可有效抑制EC9706细胞GTPBP4基因表达，从而抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡、增强细胞对放射线的敏感性。