YTHDF1对HBV蛋白表达和HBsAg和HBeAg抗原分泌的作用

• 作者: 谢永丽 汤华
• 来源期刊: 天津医科大学学报
• 关键词: 肝癌 乙型肝炎病毒 YTH N6-甲基腺苷RNA结合蛋白1 乙型肝炎病毒表面抗原 乙型肝炎病毒e抗原
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 461-466
• 页数: 6页
• 分类号: R373.2+1
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨YTH N6-甲基腺苷RNA结合蛋白1(YTHDF1)对乙型肝炎病毒(HBV)蛋白表达和抗原分泌的影响.方法:分别以pCD3/Flag-KBE和pSilencer2.1-U6 neo为载体,构建过表达和敲降YTHDF1质粒.在Huh7细胞中过表达HBV蛋白质粒的同时表达pshR-YTHDF1和对照质粒,通过Western印迹检测YTHDF1对HBV蛋白表达的影响.在HepG2.2.15细胞中过表达和敲降YTHDF1,在Huh7细胞中同时过表达pHBV1.3质粒,通过ELISA检测YTHDF1对HBsAg、HBeAg抗原分泌的影响.结果:与正常肝细胞相比,YTHDF1在肝癌细胞Huh7(t=17.4)、HepG2.2.15细胞中(t=39.6)高表达.成功构建过表达和敲降YTHDF1质粒并验证其有效.敲降YTHDF1抑制HBV基因组编码的HBc蛋白(t=9.5)、HBs蛋白(t=5.2)、preS1蛋白(t=25.7)、preS2蛋白(t=9.0)、HBx蛋白(t=19.7)、HBV DNA Pol蛋白(t=23.0)表达,差异均有统计学意义(均P＜0.05).过表达YTHDF1促进-HBsAg(Huh7细胞 t48 h=5.5,t72 h=5.0;Hep G2.2.15细胞 t48 h=5.3,t72 h=27.4)、HBeAg 抗原(Huh7细胞t48 h=5.7,t72 h=6.3;HepG2.2.15细胞t48 h=29.0,t72h=6.6)的分泌,而敲降YTHDF1 抑制 HBsAg(Huh7细胞 t48 h=16.0,t72 h=7.9;HepG2.2.15细胞 t48h=22.3,t72h=7.0)、HBeAg 抗原(Huh7细胞t48h=9.0,t72h=14.3;HepG2.2.15细胞t48h=8.1,t72h=6.6)的分泌(均 P＜0.05).结论:YTHDF1可能具有增加HBV蛋白表达及促进HBsAg和HBeAg抗原分泌的作用.