牛无浆体PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 陈宋琴 葛晓敏 李才善 郑会珍 韦丽婷 张婷 郭庆勇
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 关键词: 牛无浆体 PCR 临床应用 系统进化
• 年，卷（期）: 2021,（7）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 834-839
• 页数: 6页
• 分类号: S852.64
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0121

摘要

为建立快速、特异、敏感的牛无浆体(Anaplasma bovis)PCR检测方法及了解新疆部分地区牛无浆体感染情况,根据牛无浆体16SrRNA基因序列(MH255941.1)设计1对引物,建立了检测牛无浆体PCR方法,并进行特异性、敏感性、重复性试验、临床样品检测及系统进化分析.结果显示,所建立的方法能特异性地鉴别牛无浆体,与环形泰勒虫(Theileria annulata)、绵羊无浆体(A.ovis)、牛巴贝斯虫(Babesia bovis)、双芽巴贝斯虫(B.bigemina)基因组均无交叉反应,该方法检测下限可达到1.02×10-18 g/μL,比文献报道的PCR敏感10倍(8.9×10-18 g/μ L);具有良好的重复性;对94份牛临床血液样品检测结果表明,牛无浆体的阳性率为54.3％(51/94),高于文献报道的PCR方法的检测结果37.2％(35/94);系统进化树显示,三个地区的牛无浆体菌株都不在同一分支上.结论,成功构建了牛无浆体PCR快速检测方法,这为牛无浆体的快速诊断及流行病学调查奠定基础.