绵羊肺炎支原体特异性分子检测靶标的筛选与应用

• 作者: 陈芙 储岳峰 刘保红 陈胜利 郝华芳 王鹏雁 颜新敏
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 关键词: 绵羊肺炎支原体 分子诊断靶标 筛选
• 年，卷（期）: 2021,（7）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 848-856
• 页数: 9页
• 分类号: S852.62
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0086

摘要

本文旨在筛选出特异性的绵羊肺炎支原体(Mycoplasmna ovipneumoniae)分子检测靶标,利用全基因组BLASTn筛选出绵羊肺炎支原体特异性蛋白基因序列,再运用NCBI线上Primer BLAST程序,选择G/C含量较高的4个靶基因设计11对引物,通过引物筛选和反应条件的优化,成功筛选到一对针对靶标728序列的特异性引物7282F/2R.用该引物对53株绵羊肺炎支原体菌株、15株其它支原体和18株常见反刍动物细菌的DNA进行扩增,并对27份临床样品进行检测.结果显示,7282F/2R只能从绵羊肺炎支原体菌株DNA扩增出288 bp目的片段,且具有良好的敏感性,与已发表方法相比特异性更好,更适合于绵羊肺炎支原体检测.