腺苷一磷酸活化蛋白激酶在严重烫伤大鼠骨骼肌萎缩中的作用

• 作者: 邓虎平 蔡建华 柴家科 申传安 李利根 孙天骏 陈晶晶 李东杰 董宁 刘玲英
• 来源期刊: 中华烧伤杂志
• 关键词: 烧伤 肌，骨骼 腺苷一磷酸活化蛋白激酶 蛋白分解代谢
• 年，卷（期）: 2021,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 640-646
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn501120-20200416-00227

摘要

目的:探讨严重烫伤大鼠骨骼肌中腺苷一磷酸活化蛋白激酶（AMPK）的表达和磷酸化水平变化及其在严重烫伤大鼠骨骼肌萎缩中的作用。方法:采用实验研究方法。将100只6周龄雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为假伤组和烫伤组，每组50只。测量2组大鼠体重后，烫伤组背部造成30%体表总面积Ⅲ度烫伤，假伤组模拟致烫伤。伤后6 h及1、3、5、7 d，每组各取10只大鼠，测量体重及趾长伸肌和比目鱼肌重量。伤后6 h及1、3、5、7 d，收集2组大鼠胫骨前肌，采用实时荧光定量反转录PCR法检测肌肉萎缩盒F蛋白（MAFbx）和肌肉特异性环指蛋白1（MuRF1）mRNA表达；采用高效液相色谱法检测腺苷一磷酸（AMP）、腺苷二磷酸和ATP含量，并计算AMP/ATP比值及能荷；采用蛋白质印迹法检测AMPK-α及磷酸化AMPK-α（p-AMPK-α）蛋白表达，并计算p-AMPK-α/AMPK-α比值；2组各时间点样本数均为4。对数据行析因设计方差分析及LSD检验。结果:伤前及伤后各时间点，2组大鼠体重相近（ P>0.05）。伤后6 h，烫伤组大鼠趾长伸肌重量为（0.107±0.007）g，明显重于假伤组的（0.086±0.007）g（ P<0.01）；伤后3 d，烫伤组大鼠趾长伸肌重量为（0.083±0.016）g，明显轻于假伤组的（0.102±0.005）g（ P<0.01）。2组大鼠伤后各时间点比目鱼肌重量相近（ P>0.05）。与假伤组比较，烫伤组大鼠伤后6 h胫骨前肌MAFbx mRNA及伤后6 h和1 d胫骨前肌MuRF1 mRNA表达明显上调（ P<0.01）。与假伤组比较，烫伤组大鼠伤后6 h和7 d胫骨前肌AMP/ATP比值明显升高（ P<0.05或 P<0.01），能荷明显下降（ P<0.01）。伤后各时间点，2组大鼠胫骨前肌AMPK-α蛋白表达相近（ P>0.05）。伤后6 h和7 d，烫伤组大鼠胫骨前肌p-AMPK-α/AMPK-α比值明显高于假伤组（ P<0.05或 P<0.01）。 结论:严重烫伤后大鼠骨骼肌能荷下降，AMP/ATP比值升高，激活AMPK；伤后早期AMPK的活化与MAFbx和MuRF1表达上调和骨骼肌重量下降一致，可能是严重烫伤大鼠骨骼肌萎缩发生的分子机制之一。