胡黄连苷对SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/复氧复糖损伤保护作用

• 作者: 王潇璐 于竹芹 汪贯习 刘宗保 周缜 郭云良
• 来源期刊: 青岛大学学报（医学版）
• 关键词: 胡黄连甙 再灌注损伤 卒中 神经保护 氧化性应激
• 年，卷（期）: 2021,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 537-543
• 页数: 7页
• 分类号: R743.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.11712/jms.2096-5532.2021.57.032

摘要

目的 探讨胡黄连苷对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/复氧复糖(OGD/R)损伤的保护作用及其最佳剂量.方法 体外培养SH-SY5Y细胞,建立OGD/R模型.于复氧复糖时分别加入胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅲ各5个浓度梯度(5、10、20、40、80μmol/L),优化最佳剂量.后续选用胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅲ各自的最佳剂量,进行2×2×2析因设计分组.光学显微镜下观察各组细胞形态学变化,采用CCK-8法检测细胞存活率,采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定细胞损伤程度,采用荧光探针DCFH-DA标记法检测细胞内活性氧(ROS)的水平,根据用药剂量及结果综合评价胡黄连苷的保护作用.结果 与对照组相比较,OGD/R后SH-SY5Y细胞的形态结构发生改变,模型组细胞变圆或肿胀,突起回缩或消失,细胞膜有皱褶或破损,细胞数目明显减少,漂浮细胞增多;与模型组相比较,胡黄连苷组细胞损伤得到不同程度的改善,细胞贴壁性增强.对各指标进行综合分析,从用药剂量最小化和疗效最大化的角度考虑,选用胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅲ的最佳剂量为20μmol/L进行后续实验.胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅲ联合应用组与其他组相比,细胞形态较完整,细胞贴壁性强,细胞存活率明显提高,LDH含量下降,细胞损伤明显减轻,ROS水平下降(F=82.9～186.3,P<0.01).结论 胡黄连苷可能通过抗氧化应激对SH-SY5Y细胞OGD/R损伤发挥神经保护作用,且胡黄连苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各20μmol/L时联合使用效果最好.