铜绿假单胞菌flgE和oprL基因联合DNA疫苗的免疫效果

• 作者: 宫强 翟文汉 李雅静 牛明福 秦翠丽 侯颖
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 关键词: 铜绿假单胞菌 pflgE pOPRL 联合DNA疫苗 免疫效果
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 715-721
• 页数: 7页
• 分类号: S855.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0126

摘要

为测试铜绿假单胞菌flgE和oprL基因的联合DNA疫苗在小鼠体内的免疫效果,本试验分别构建铜绿假单胞菌flgE和oprL基因的DNA疫苗pflgE和pOPRL,并制备了联合DNA疫苗pflgE+pOPRL,同时设灭活疫苗作为阳性对照,pcDNA3.1(+)空载体和PBS分别作为阴性对照,免疫BALB/c小鼠,间接ELISA检测免疫后小鼠血清特异性抗体水平,MTT法检测免疫小鼠脾淋巴细胞增殖情况(SI值),双抗夹心ELISA测定脾淋巴细胞分泌的IFN-y和IL-2的水平,通过攻毒试验并计算各疫苗的保护率.间接ELISA结果显示,以铜绿假单胞菌裂解液为包被抗原检测pflgE+pOPRL组小鼠的抗体水平显著高于pflgE组和pOPRL组(P＜0.05),但以菌毛蛋白和外膜蛋白为包被抗原时pflgE+pOPRL组小鼠的抗体水平则分别低于pflgE组(P＜0.05)和pOPRL组(P＜0.05).pflgE+pOPRL组的SI值及IFN-y和IL-2的分泌水平与灭活疫苗组相当,且显著高于两种单价DNA疫苗组(P＜0.05).攻毒试验结果显示,各疫苗均可为小鼠提供一定的保护力,其中灭活疫苗保护率最高(83.3％),联合DNA疫苗的保护率为72.2％,pflgE和pOPRL疫苗则较低,分别为55.6％和50％.结论,以铜绿假单胞菌flgE和oprL基因构建的DNA疫苗,尤其是二价组合DNA疫苗,具有一定的应用前景.