内质网应激在缺血再灌注急性肾损伤中的作用

• 作者: 王顺 穆妮热·阿卜力孜 黄萱 李素华
• 来源期刊: 中华实用诊断与治疗杂志
• 关键词: 急性肾损伤 缺血再灌注 内质网应激 细胞凋亡 大鼠
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 急性肾损伤专题
• 页码范围: 445-450
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13507/j.issn.1674-3474.2021.05.004

摘要

目的 观察缺血再灌注急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)大鼠内质网应激相关凋亡蛋白caspase-12、c-Jun氨基端激酶1(c-Jun N-terminal kinase 1,JNK1)、转录因子C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)表达变化,探讨内质网应激在缺血再灌注AKI中的作用.方法 雄性Wistar大鼠75只,随机分为模型组27只,假手术组24只,正常组24只.模型组切除右肾、夹闭左肾动脉45 min后恢复灌流制备缺血再灌注AKI模型,24只造模成功;假手术组仅切除右肾、不夹闭左肾动脉;正常组仅麻醉不开腹.造模成功后1、5、12、24 h时3组分别处死6只大鼠,取腹主动脉血检测血肌酐水平,取肾脏组织行HE染色观察肾脏形态学改变并计算肾小管损伤评分,分别采用实时荧光定量PCR法、Western blot法检测肾脏组织caspase-12、JNK1、CHOP mRNA及蛋白相对表达量;造模后24 h采用TUNEL法观察3组肾小管上皮细胞凋亡情况并计算总积分吸光度值;Pearson相关法分析造模后24 h内质网应激相关凋亡蛋白表达与肾小管损伤评分的相关性.结果 造模后1、5、12、24 h,模型组血肌酐水平均高于假手术组和正常组(P＜0.05),假手术组与正常组比较差异均无统计学意义(P＞0.05);模型组造模后12、24 h血肌酐水平高于1、5 h(P＜0.05).模型组造模后1、5、12、24 h肾小管损伤评分均高于假手术组和正常组(P＜0.05);假手术组造模后24h肾小管损伤评分高于正常组(P＜0.05);模型组造模后24h肾小管损伤评分高于1、5、12 h(P＜0.05),12h高于1、5 h(P＜0.05),1、5h比较差异无统计学意义(P＞0.05);假手术组造模后24h肾小管损伤评分高于1、5 h(P＜0.05),1、5、12h比较差异均无统计学意义(P＞0.05).造模后24 h镜下观察模型组肾小管上皮细胞凋亡细胞数量多于假手术组和正常组;造模后24 h模型组总积分吸光度值(22 963.59±10 334.90)高于假手术组(4 186.20±679.96)和正常组(1 668.07±205.05)(P＜0.05),假手术组高于正常组(P＜0.05).造模后1、5、12、24 h模型组肾脏组织JNK1、CHOP mRNA及蛋白相对表达量及造模后1、5、12、24 h模型组肾脏组织caspase-12 mRNA和造模后12、24 h肾脏组织caspase-12蛋白相对表达量均高于假手术组和正常组(P＜0.05),假手术组与正常组比较差异均无统计学意义(P＞0.05);模型组造模后12、24 h肾脏组织caspase-12、JNK1、CHOP mRNA及蛋白相对表达量高于1、5 h(P＜0.05),1、5h比较差异无统计学意义(P＞0.05);假手术组、正常组造模后1、5、12、24 h肾脏组织caspase-12、JNK1、CHOP mRNA及蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P＞0.05).造模后24 h模型组大鼠肾脏组织caspase-12(r=0.474,P=0.010)、JNK1 (r=0.650,P＜0.001)、CHOP蛋白相对表达量(r=0.571,P=0.002)与肾小管损伤评分呈正相关.结论 缺血再灌注AKI大鼠肾脏组织内质网应激相关凋亡蛋白caspase-12、JNK1、CHOP表达随时间延长逐渐增高,其表达越高反映肾小管损伤程度越重,内质网应激参与了缺血再灌注AKI的发生.