莱菔硫烷诱导急性髓系白血病KG1a和KG1细胞G2/M期阻滞的作用和相关机制

• 作者: 王凡平 乔彩娟 孙彦威 李向阳 黄晓愉 张文芮 王侠 王明永
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 关键词: 莱菔硫烷 白血病细胞 细胞周期 G2/M期
• 年，卷（期）: 2021,（4）
• 所属期刊栏目: 白血病基础与临床|Leukemia Basis and Clinic
• 页码范围: 1050-1055
• 页数: 6页
• 分类号: R733.71
• 语种: 中文
• DOI: 10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2021.04.006

摘要

目的:研究莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对急性髓系白血病细胞G2/M期阻滞的作用和相关机制.方法:不同浓度的SFN作用KG1a和KG1细胞48 h后,流式细胞术检测细胞周期的变化,利用高通量转录组测序技术检测SFN对KG1a细胞周期相关基因表达情况的影响;采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测P53、P21、CDC2、CyclinB1的mRNA表达.采用Western blot检测P53、CDC2、P-CDC2和CyclinB1的蛋白表达.结果:经SFN作用48 h后,KG1a和KG1细胞的G2/M期细胞明显增多,当SFN浓度为8 μmol/L时,KG1a细胞在G2/M期从11.9％上升至54.0％,KG1细胞从18.5％上升至83.3％(P＜0.001).SFN作用KG1a细胞后,KEGG通路分析结果显示,差异表达基因显著富集P53信号通路.热图结果显示,P53和P21基因表达上调,CDC2基因表达下调.KG1a和KG1细胞经SFN作用后,p53和P21的mRNA水平均出现上调(P＜0.05或P＜0.01).随着SFN剂量的上升,CDC2的mRNA水平呈下调趋势,当SFN为8 μmol/L时,CDC2的mRNA表达水平显著低于对照组(P＜0.05).经SFN作用KG1a和KG1后,p53的蛋白水平出现上调,SFN 8和12 μmol/L浓度组均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).两组细胞经SFN作用后CDC2的蛋白水平均明显下降,且呈浓度依赖趋势(r=0.9482和r = 0.8977),SFN 8和12 μmol/L浓度组CDC2蛋白水平均明显低于对照组(P＜0.05或P＜0.01),P-CDC2蛋白表达水平上调.Cy-clinB1 的蛋白和mRNA表达水平一致,变化不明显.结论:SFN可能通过激活P53信号通路,进一步抑制CDC2表达和CDC2/CyclinB1复合物的活性,诱导急性髓系白血病KG1a和KG1细胞阻滞在G2/M期.