不同启动子调控外源基因在斑玉蕈中的表达分析

• 作者: 杜莎莎 鲍大鹏 马丽娟 李晓玲 尚俊军
• 来源期刊: 菌物学报
• 关键词: 启动子 遗传转化 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2021,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文|Research papers
• 页码范围: 2065-2073
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13346/j.mycosystema.210099

摘要

启动子是控制基因转录的重要顺式元件,也是遗传转化实验中驱动外源基因表达的重要工具.在同一真菌中,不同启动子驱动外源基因表达水平可能存在明显差异.因此,选择合适的启动子是提高外源基因表达水平的关键.本研究分别应用花椰菜病毒35S RNA (cauliflower mosaic virus 35S RNA,CaMV35S)和斑玉蕈甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Hypsizygus marmoreus glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,HmGPD)基因的启动子构建了两个遗传转化质粒,在斑玉蕈中分别驱动外源的植物花青素合成基因表达,并利用来自刺芹侧耳的萎锈灵抗性基因进行转基因筛选.两个质粒通过农杆菌介导转化斑玉蕈单核菌株后,对具有萎锈灵抗性的转化子经PCR方法进行转基因验证,并运用实时荧光定量PCR对阳性转化子中外源基因的表达水平进行比较分析.结果 表明,CaMV35S和HmGPD基因的启动子均成功驱动了植物花青素合成基因在斑玉蕈中转录,为增强基因表达而引入的内含子在转录过程中均被正确切割.其中,HmGPD启动子驱动外源基因表达水平比CaMV35S启动子驱动外源基因表达水平强22-36倍.