川楝素通过下调c-kit表达抑制GIST-T1细胞增殖并促进其凋亡

• 作者: 胡笑宇 杨文生 康政宇 彭正伟 李玲 刘希 陈诣佳 张林
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 关键词: 胃肠间质瘤 川楝素 伊马替尼 细胞增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2021,（13）
• 所属期刊栏目: 基础医学|Basic Medicine
• 页码范围: 1235-1242
• 页数: 8页
• 分类号: R285.5|R73-361|R730.262
• 语种: 中文
• DOI: 10.16016/j.1000-5404.202012232

摘要

目的 研究川楝素(toosendanin,TSN)对胃肠间质瘤细胞增殖及凋亡的影响,并对其相关机制进行初步探索.方法 不同浓度TSN体外干预GIST-T1细胞,采用CCK-8检测TSN对GIST-T1细胞增殖的影响;根据结果进一步选择实验浓度,分为0、15、30 nmol/L TSN组,50 nmol/L伊马替尼(imatinib,IM)作为阳性对照;流式细胞仪及Hoechst 33342/PI荧光双染检测细胞凋亡及细胞周期;qRT-PCR及Western blot检测c-KIT/PI3K/AKT/mTOR mRNA及相关蛋白表达.结果 TSN可抑制GIST-T1细胞增殖(P＜0.01),其48 h IC50为18.75 nmol/L,72 h IC50为17.93 nmol/L.与对照组相比,15、30 nmol/L TSN组,50 nmol/L IM均可引起不同程度细胞凋亡(P＜0.01),但各药物组间凋亡率差异无统计学意义.30 nmol/L TSN可使细胞周期发生S期阻滞(P＜0.01).qRT-PCR检测结果显示:15 nmol/L TSN即可下调GIST-T1细胞c-KIT、PI3K、AKT、mTOR mRNA表达(P＜0.05,P＜0.01).Western blot结果也证实:15 nmol/L TSN同样抑制了c-KIT、PI3K、AKT、mTOR及其磷酸化蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01).结论 TSN通过下调c-KIT表达,抑制GIST-T1细胞增殖并促进凋亡,可能是通过PI3K/AKT/mTOR通路发挥作用.