短发卡RNA抑制survivin表达并诱导CNE-2细胞凋亡

• 作者: 张楠 李晓江 王涵 王虎 赵留芳 马静
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: RNA干扰 质粒 存活素基因 鼻咽肿瘤 基因疗法 短发卡RNA 转染
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 430-434
• 分类号: R739.63
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2012.04.008

摘要

目的 观察以短发卡RNA(shRNA)抑制鼻咽癌细胞survivin表达对细胞凋亡与增殖的影响.方法 构建特异性survivin shRNA,转染CNE-2细胞.分组:A组为空白对照组；B组为阴性干扰组,转染pSIREN-survivin/nonsenseshRNA;C组为阳性干扰24 h组,转染pSIREN-survivin/shRNA;D组为阳性干扰48 h组,转染pSIREN-survivin/shRNA.以RT-PCR、Western-blot分别测定细胞survivin mRNA及蛋白,PI、TUNEL及MTT检测细胞周期、凋亡率、细胞增殖.结果 转染效率约(70.90±4.76)％；C组survivin mRNA和蛋白抑制率分别为(41.58±0.63)％、(68.29±0.52)％；D组抑制率分别为(63.64±0.96)％、(70.83±0.48)％.C组凋亡率为(36.24±0.78)％,D组为(50.37±0.85)％,显著高于B组和A组；S期细胞减少,G2/M期比例增高；MTT结果提示细胞增殖受到明显抑制.结论 特异性shRNA可有效干扰CNE-2内survivin的表达,诱导细胞凋亡并抑制其过度增殖.