短发卡状RNA对AKT2基因表达的抑制诱导人胰腺癌细胞凋亡

• 作者: 张征 王江华 蔡庆和 车军 陈先祥
• 来源期刊: 郧阳医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: AKT2 shRNA 胰腺癌 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 198-201,204,封二
• 页数: 6页
• 分类号: Q782|Q255
• 字数: 3156字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-9674.2006.04.002

摘要

目的:构建AKT2基因特异性短发卡状RNA(shRNA)真核表达载体,运用RNA干扰(RNAi)技术,观察其对人胰腺癌细胞SW1990和Capan2中AKT2蛋白激酶表达的抑制作用,并探讨其增强肿瘤细胞对化疗药物敏感性,促进细胞凋亡的机制.方法:运用基因工程技术,设计合成针对AKT2 mRNA的特异性shRNA,构建真核表达载体pAKT2-shRNA.将pAKT2-shRNA经脂质体包裹转染人胰腺癌细胞SW1990和Capan2,荧光显微镜观察细胞内红色荧光蛋白的表达,计算转染效率,RT-PCR、Western Blot检测AKT2的表达及干扰效率,FACS检测细胞凋亡率来比较转染前后人胰腺癌细胞的抗凋亡能力.结果:①经双酶切及测序证实pAKT2-shRNA构建成功.②SW1990和Capan2细胞转染pAKT2-shRNA后,荧光显微镜下观察,发红色荧光的细胞占总细胞数的35%～40%;RT-PCR和Western Blot检测结果示,转染后AKT2 mRNA和蛋白表达显著降低.③FACS检测结果示,转染pAKT2-shRNA后,紫杉醇30 nM作用24h,与对照组相比,细胞凋亡率显著升高(P＜0.05).结论:pAKT2-shRNA能有效抑制胰腺癌细胞AKT2基因表达,增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,促进肿瘤细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈先祥	郧阳医学院附属人民医院普外科	10	75	3.0	8.0
2	蔡庆和	郧阳医学院附属人民医院普外科	12	90	5.0	9.0
3	车军	郧阳医学院附属人民医院普外科	18	119	7.0	10.0
4	张征		2	13	1.0	2.0
5	王江华		3	6	2.0	2.0