无血清悬浮培养MDCK-siat7e细胞的传代稳定性

• 作者: 张生琰 吴元元 孙燕 刘鹏 孙振鹏 王革 李薇
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 关键词: MDCK-siat7e细胞 无血清培养 传代稳定性 致瘤性
• 年，卷（期）: 2021,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1039-1043
• 页数: 5页
• 分类号: R378.1+4
• 语种: 中文

摘要

目的 研究连续传代的犬肾上皮(Madin-Darby canine kidney,MDCK)细胞MDCK-siat7e的传代稳定性.方法 复苏工作细胞库,连续传45代,比较不同代次(0、7、17、28、45代)MDCK-siat7e细胞生长4d的形态、0～9d的生长曲线及比生长速率(μ)、葡萄糖比消耗率[Qi(Gluc)24h]、乳酸比生成率[Qi(Lac)24h]、氨比生成率[Qi(NH4+)24h].采用qRT-PCR法检测不同代次MDCK-siat7e细胞中siat7e基因的表达量.采用裸鼠体内接种法检测连续传代至第45代的MDCK-siat7e细胞的成瘤性;采用细胞裂解物裸鼠体内接种法和细胞DNA裸鼠体内接种法检测连续传代至第45代的MDCK-siat7e细胞的致瘤性.结果 5个不同代次的MDCK-siat7e细胞在培养4d时均呈圆形,细胞边缘清晰,均匀分散于培养液中,无聚团现象,呈悬浮生长状态,生长状态良好.不同代次MDCK-siat7e细胞的μ、Qi(Gluc)24h、Qi(Lac)24 h及Qi(NH4+)24h差异均无统计学意义(P＞0.05).不同代次MDCK-siat7e细胞siat7e基因表达量差异均无统计学意义(P＞0.05).连续传代至第45代的MDCK-siat7e细胞无明显的致瘤性.结论 MDCK-siat7e细胞连续传代至45代时,细胞形态基本保持一致,目的 基因稳定,无致瘤性.