siRNA抑制人卵巢癌SKOV-3细胞MDM2的表达及细胞增殖的研究

• 作者: 王莹 贾志勇 赵燕颖
• 来源期刊: 中国实验诊断学
• 关键词: siRNA 卵巢癌细胞 MDM2 Western blot
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 421-425
• 页数: 5页
• 分类号: R737.31
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4287.2021.03.037

摘要

目的 研究siRNA对人卵巢癌细胞SKOV-3细胞MDM2基因表达的抑制作用及对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响.方法 体外合成2对针对MDM2基因的siRNA,经脂质体转染导入SKOV-3细胞;转染siRNA MDM2(简称si-MDM2)转染阴性对照质粒到SKOV-3,并设只加转染试剂作空白对照组,采用MTT法检测si-MDM2对细胞增殖的抑制作用.流式细胞仪检测细胞凋亡,并用Real-time PCR和Western blot分别从mRNA水平和蛋白水平检测si-MDM2对MDM2的抑制作用.结果 MTT结果表明转染siRNA MDM2后细胞生长受到抑制,与对照组比差异具有显著性(P＜0.05);同时细胞发生凋亡和细胞周期阻滞,转染siRNA MDM2-1,2的凋亡率分别为47.8％和39.2％,转染阴性对照质粒和对照组未检测出明显的增殖抑制和凋亡改变.转染siRNA MDM2的细胞的MDM2基因表达分别下调到对照组的48.41％和46.51％;转染阴性对照质粒的MDM2基因没有明显改变.转染siRNAMDM2的细胞的MDM2蛋白表达水平同样显著低于对照组细胞(P＜0.05).结论 siRNA MDM2可以有效抑制SKOV-3细胞株中MDM2的表达,并抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡.