致敏性CD4 + T细胞来源的外泌体介导心肌梗死后心肌重构的机制研究

• 作者: 赵芯晨 王晶 何婧瑜 田欣 朱丹丹 王娇阳 蔡利栋
• 来源期刊: 中华危重病急救医学
• 关键词: 心肌梗死 CD4 + T细胞 心肌纤维化 外泌体
• 年，卷（期）: 2021,（11）
• 所属期刊栏目: 论著·重症心脏（基础研究）
• 页码范围: 1332-1336
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn121430-20210709-01038

摘要

目的:研究致敏性CD4 + T细胞在心肌梗死（心梗）后心肌重构中的作用。 方法:①体外实验：提取原代小鼠脾脏CD4 + T细胞，用CD3/CD28抗体处理48 h后，超高速离心并提取细胞上清液中的外泌体。将致敏性CD4 + T细胞来源的外泌体与心肌成纤维细胞共同孵育48 h，利用细胞增殖及细胞毒性检测实验（CCK-8）、Transwell实验及免疫荧光实验检测致敏性CD4 + T细胞来源的外泌体对心肌成纤维细胞增殖、迁移及分化的影响。②体内实验：利用随机数字表法将40只雄性C57小鼠分成对照组（Ctrl组）、假手术组（Sham组）、心梗组（MI组）、外泌体处理组（MI+Exo组），每组10只。采用结扎冠状动脉左前降支复制小鼠心梗模型。MI+Exo组于制模后尾静注射外泌体40 μg/d。术后4周，用心脏超声、定量聚合酶链反应（qPCR）评估致敏性CD4 + T细胞来源的外泌体对小鼠心功能状态及心脏纤维化程度的影响。 结果:①体外实验：致敏性CD4 + T细胞来源的外泌体可以显著增加心肌成纤维细胞增殖、迁移及分化能力〔细胞增殖（ A值）：0.31±0.01比0.21±0.01，迁移能力（个/MP）：79.20±3.34比48.80±2.13，分化能力（α-平滑肌肌动蛋白，α-SMA；荧光强度）：1.56±0.03比1.00±0.02，均 P<0.05〕。②体内实验：致敏性CD4 + T细胞来源的外泌体可加速心梗后心功能的恶化，表现为：与MI组比较，MI+Exo组左室射血分数（LVEF）及短轴收缩率（FS）显著下降〔LVEF：0.185±0.008比0.257±0.022，FS：（9.72±1.72）%比（14.08±1.08）%，均 P<0.05〕，左室舒张期末内径（LVEDD）及左室收缩期末内径（LVESD）显著增加〔LVEDD（mm）：5.43±0.29比4.62±0.35，LVESD（mm）：4.94±0.12比3.69±0.29，均 P<0.05〕。另外，qPCR结果显示，致敏性CD4 + T细胞来源的外泌体具有促进心梗后心肌纤维化的发生，表现为：MI+Exo组α-SMA、胶原（Col1a1、Col3a1）的mRNA表达显著高于MI组〔α-SMA（2 -ΔΔCT）：4.72±0.89比3.58±0.78，Col1a1（2 -ΔΔCT）：6.59±0.56比4.23±0.42，Col3a1（2 -ΔΔCT）：13.40±1.03比4.96±0.36，均 P<0.05〕。 结论:致敏性CD4 + T细胞来源的外泌体具有显著加速心梗后心肌病理性重构的作用。