Gsα在肥厚心肌中的表达及敲除后对心脏发育的影响

• 作者: 银萍 赵奇 石毓君 苏立
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 关键词: 主动脉弓缩窄 心肌肥厚 心脏发育 Gsα 他莫昔芬 基因敲除
• 年，卷（期）: 2021,（14）
• 所属期刊栏目: 基础医学|Basic Medicine
• 页码范围: 1319-1325
• 页数: 7页
• 分类号: R363.21|R394.3|R542.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.16016/j.1000-5404.202101167

摘要

目的 通过主动脉缩窄术(transverse aortic constriction,TAC)建立压力超负荷诱导心肌肥厚的小鼠模型,检测肥厚心肌组织中Gsα表达变化,同时构建诱导性心肌特异性Gsα缺失小鼠,观察Gsα缺失对幼鼠心肌发育的影响.方法 10只健康雄性C57BL/6小鼠,按随机数字表法分为手术组(TAC组,n=5)和假手术组(Sham组,n=5),TAC组小鼠行主动脉弓缩窄术,Sham组小鼠仅穿线而不缩窄主动脉.术后4周,采用超声心动图检测小鼠左心功能,运用病理组织染色观察小鼠心肌结构变化,利用RT-qPCR及Western blot检测小鼠心肌组织中Gsα表达;采用Cre-Loxp系统,将Gsαfl/fl小鼠与Myh6-MerCreMer 小鼠杂交获得诱导性Myh6-MerCreMer+/-/Gsαfl/fl(MCM/Gsαfl/fl)小鼠.哺乳期MCM/Gsαfl/fl小鼠予腹腔注射他莫昔芬(tamoxifen,TMX,20 mg/mL),连续10 d,通过哺乳方式将TMX传递给幼鼠,构建诱导性心肌特异性Gsα缺失幼鼠.记录幼鼠体质量增长以及生存率,利用病理组织染色观察心肌的结构变化.结果 术后4周,超声心电图结果显示TAC组小鼠较Sham组小鼠舒张末期左室后壁增厚(P＜0.01)、舒张末期室间隔增厚(P＜0.05)、舒张末期左室内径减小(P＜0.05),提示心肌发生了代偿性肥厚;组织病理学检测提示TAC组小鼠心肌横截面积显著增大(P＜0.01),血管周围纤维化明显增加(P＜0.01);RT-qPCR以及Western blot结果提示Gsα mRNA及蛋白表达水平增加(P＜0.05).与玉米油诱导对照组相比,TMX诱导Gsα缺失的幼鼠出现生长迟缓、体质量显著降低(P＜0.05);组织学染色提示TMX诱导的幼鼠心脏大小明显减小.结论 Gsα在压力超负荷诱导心肌肥厚心肌中的表达上调.Gsα敲除后幼鼠生长延迟、心脏发育受阻,提示Gsα可能参与心脏生理发育及后负荷增加所致代偿性心肌肥厚过程.