抗高迁移率族蛋白1中和抗体对肝癌细胞BEL-7402/ADM药物敏感性的影响

• 作者: 周薇 高丹丹 李军华
• 来源期刊: 现代肿瘤医学
• 关键词: 高迁移率族蛋白1 肝癌细胞 药物敏感性 阿霉素 核因子-κB
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究|Basic research
• 页码范围: 744-748
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4992.2021.05.006

摘要

目的:探讨抗高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1,HMGB1)中和抗体对肝癌细胞药物敏感性的影响及可能机制.方法:采用阿霉素(adriamycin,ADM)小剂量持续诱导法建立肝癌细胞耐药细胞株BEL-7402/ADM.实验分为BEL-7402/ADM组、ADM组及ADM+抗HMGB1中和抗体组,MTT法检测细胞对ADM的敏感性及抗HMGB1中和抗体对细胞的低毒性,Annexin V-FITC流式细胞法检测细胞凋亡情况,酶标法检测Caspase-9、Caspase-3活性,Western-blot方法检测核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)亚单位p-p65、Bcl-2蛋白的表达.结果:ADM对亲本株的半数抑制浓度(IC50)为0.23μg/mL,对肝癌细胞耐药株BEL-7402/ADM的IC50上升至4.07μg/mL,耐药指数为17.7.联合抗HMGB1中和抗体能明显提升ADM对BEL-7402/ADM细胞增殖抑制率,IC50下降至0.91μg/mL;加用逆转浓度(19 ng/mL)的抗HMGB1中和抗体组的BEL-7402/ADM细胞凋亡率较单用ADM组的凋亡率明显上升(P<0.01).与BEL-7402/ADM组相比,ADM组细胞的Caspase-9、Caspase-3活性有一定程度上升(P<0.01),联合抗HMGB1中和抗体作用后,Caspase-9、Caspase-3活性增强则更加明显(P<0.01).BEL-7402/ADM组及ADM组间p-p65、Bcl-2表达无显著差异(P>0.05),加用抗HMGB1中和抗体处理后,细胞p-p65、Bcl-2表达明显下降(P<0.01).结论:抗HMGB1中和抗体对BEL-7402/ADM细胞耐药性有逆转作用,其机制可能与下调NF-κB介导的Bcl-2表达,促进肝癌细胞凋亡有关.