外周血中5-羟色胺通过诱导中性粒细胞胞外诱捕网生成加重脓毒症小鼠肺损伤

• 作者: 黄雨朦 姬倩 朱艳艳 刘大东 付胜巧 王旭 邰宁正
• 来源期刊: 中华危重病急救医学
• 关键词: 脓毒症 5-羟色胺 中性粒细胞胞外诱捕网 肺损伤
• 年，卷（期）: 2021,（12）
• 所属期刊栏目: 论著·脓毒症（基础研究）
• 页码范围: 1423-1427
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn121430-20210427-00625

摘要

目的:观察外周5-羟色胺（5-HT）诱导中性粒细胞胞外诱捕网（NET）的生成对脓毒症小鼠肺损伤的影响。方法:选择6~8周龄野生型（WT型）和Tph1基因敲除（Tph1 KO）C57小鼠，按随机数字表法分为WT小鼠假手术组、WT小鼠脓毒症组和Tph1 KO小鼠假手术组、Tph1 KO小鼠脓毒症组。假手术组小鼠接受假手术处理（仅打开腹腔翻动盲肠但不结扎和穿刺，然后关腹）；脓毒症组小鼠接受盲肠结扎穿孔术（CLP）建立脓毒症模型。术后12 h处死小鼠，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）含量；同时收集小鼠肺组织标本，光镜下观察肺组织病理学改变，采用免疫荧光显微镜观察小鼠肺组织中NET生成情况。 结果:病理学结果提示：假手术组小鼠肺组织结构完好，未见渗出；而脓毒症组小鼠肺泡结构破坏，肺泡腔内可见明显渗出，肺泡壁增厚并伴有大量炎性细胞浸润，且WT小鼠脓毒症组肺损伤程度较Tph1 KO小鼠脓毒症组严重。ELISA结果显示：不同品系假手术组小鼠BALF中TNF-α和IL-6含量比较差异无统计学意义；而脓毒症组小鼠BALF中TNF-α和IL-6含量均较假手术组明显升高〔WT小鼠：TNF-α（μg/L）为158.20±28.46比14.00±3.28，IL-6（μg/L）为304.98±21.78比57.70±12.30；Tph1 KO小鼠：TNF-α（μg/L）为85.88±20.13比14.95±1.53，IL-6（μg/L）为169.50±45.61比55.05±12.68，均 P<0.01〕，且WT小鼠脓毒症组上述指标水平均明显高于Tph1 KO小鼠脓毒症组〔TNF-α（μg/L）：158.20±28.46比85.88±20.13，IL-6（μg /L）：304.98±21.78比169.50±45.61，均 P<0.01〕。免疫荧光染色显示：假手术组小鼠肺脏中均检测到极少量的NET生成；而脓毒症组小鼠肺组织中均检测到大量的NET生成，明显高于假手术组〔WT小鼠：（34.75±7.27）%比（1.75±0.96）%，Tph1 KO小鼠：（14.25±5.74）%比（2.50±1.29）%，均 P<0.01〕，且WT小鼠脓毒症组小鼠肺脏组织中NET生成量较Tph1 KO小鼠脓毒症组明显增多〔（34.75±7.27）%比（14.25±5.74）%， P<0.01〕。 结论:脓毒症时，小鼠肺组织中炎性因子产生增加导致肺损伤，其机制与外周5-HT介导的肺组织中NET的生成增加有关；抑制外周血中5-HT的产生可有效减少肺组织中NET生成，从而减轻肺损伤。