液相色谱-串联质谱法测定25-羟基维生素D

• 作者: 潘晓芳 黄燕虹 黄浩然 李海明 陈建起 吴静标
• 来源期刊: 分子诊断与治疗杂志
• 关键词: 25-羟基维生素D 25-OH VD 液相色谱-串联质谱法
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 论著|ORIGINAL ARTICLES
• 页码范围: 1010-1014
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6929.2021.06.041

摘要

目的 建立液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)同时测定血清中25-OH VD2和25-OH VD3的方法.方法 采用蛋白沉淀(PPT)和液液萃取(LLE)相结合的方法对待测的人血清样本进行前处理,然后取样本提取液用LC-MS/MS系统中进行分析.以25-OH VD同位素作为内标,通过对校准品中25-OH VD2和25-OH VD3的峰面积及其内标峰面积的比值对相应的校准品浓度拟合标准曲线,再将其他检测样本中25-OH VD2和 25-OH VD3峰面积与相应内标峰面积的比值代入拟合的标准曲线方程中计算浓度,从而LC-MS/MS快速测定25-OH VD2和25-OH VD3的方法.结果 本实验条件下可同时快速检测血清25-OH VD2和25-OH VD3,分析时间仅为2.8 min,特异性高,25-OH VD2和25-OH VD3的信噪比(S/N)最小为69,25-OH VD2和25-OH VD3分别在2～100 ng/mL和5～250 ng/mL范围内具有良好线性关系,峰面积比与对应的浓度线性相关系数均＞0.999,重复性的变异系数CV最大为3.67％和3.39％.结论 本研究成功建立了LC-MS/MS简单快捷、灵敏度高、准确测定血清25-羟基维生素D的方法.