白杨素调控NF-κB/Twist 1信号通路抑制Ⅱ型肺泡上皮细胞间质转分化的机制研究

• 作者: 卢林明 付裕 李秋阳 何晓伟 汤娟 李先伟
• 来源期刊: 中国中药杂志
• 关键词: 白杨素 上皮间质转分化(EMT) 核转录因子κB Twist 1 肺纤维化
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 药理
• 页码范围: 146-154
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.19540/j.cnki.cjcmm.20200810.402

摘要

研究白杨素(ChR)是否通过影响核转录因子κB(NF-κB)/Twist 1信号通路,进而抑制Ⅱ型肺泡上皮细胞间质转分化(EMT)而产生抗肺纤维化作用.动物实验设对照组、博莱霉素组(BLC)、BLC+ChR(50 mg,kg-1)和BLC+ChR(100 mg·kg-1)剂量组,每组动物15只.气管注射BLC(7 500 U· kg-1)诱导肺纤维化大鼠模型,造模后连续灌胃给药28 d.细胞实验设对照组、转化生长因子-β1 (TGF-β1)(5 ng·mL-1)组、TGF-β1+ChR(1,10,100 μmol, L-1)组,Ⅱ型肺泡上皮细胞先用TGF-β1处理24h,再用TGF-β1和(或)不同剂量ChR处理48 h.肺组织病理变化和胶原沉积情况分别采用HE染色、Masson染色和免疫组化法进行观察.肺组织和细胞内Ⅰ型胶原(collagen Ⅰ)、E钙粘蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白-1(ZO-1)、波形蛋白(vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、核转录因子κB抑制因子α(IκBα)、NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65(p-p65)和Twist 1 mRNA及蛋白表达分别采用qPCR和(或)Western blot法检测.动物实验结果显示,与BLC组相比,ChR给药28 d后,大鼠肺纤维化程度明显减轻;肺组织collagen Ⅰ表达明显下降(P＜0.05或P＜0.01);肺组织肺泡上皮细胞EMT程度明显受到抑制[ZO-1和E-cadherin的表达明显升高,α-SMA和vimentin的表达明显降低(P＜0.05或P＜0.01)];肺组织细胞浆内IκBα和p65磷酸化水平、胞核内NF-κB p65和Twist 1的表达水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01).细胞实验结果表明,不同剂量ChR能够明显减轻TGF-β1诱导的collagen Ⅰ的表达(P＜0.05或P＜0.01),显著抑制细胞EMT[E-cadherin和ZO-1的表达明显升高,vimentin和α-SMA的表达明显降低(P＜0.05或P＜0.01)],同时能够明显抑制TGF-β1诱导的细胞浆内IκBα和p65磷酸化水平并降低细胞核内NF-κB p65和Twist 1的表达(P＜0.05或P＜0.01).综上结果推测ChR能够逆转肺泡Ⅱ型上皮细胞EMT、缓解肺纤维化,其机制可能与其降低细胞内IκBα磷酸化水平、抑制NF-κB p65的磷酸化和其核转移,进而下调Twist 1的表达有关.