丙型肝炎病毒调控ADAR1逃避先天免疫的机制研究

• 作者: 王本鑫 王福义 孟凡鑫
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 关键词: 丙型肝炎病毒 ADAR1 先天免疫 miR-135a-5p miR-135b-5p
• 年，卷（期）: 2021,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1213-1218
• 页数: 6页
• 分类号: R446.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2021.10.014

摘要

目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)调控ADAR1逃避先天免疫的潜在机制.方法 通过siRNA敲低ADAR1(敲低组)或GFP(对照组)后,检测炎症因子和干扰素的mRNA水平、IFNγ的分泌水平和HCV的复制水平.HCV感染Huh7细胞(HCV组)或不感染Huh7细胞(M OCK组)后,检测ADAR1的mRNA水平和蛋白水平,以及ADAR1的启动子活性.通过miRDB在线预测ADAR1的miRNA.HCV感染Huh7细胞后,检测上述miRNA的表达水平.过表达差异miRNA或negative control(对照组)后检测ADAR1的表达水平.结果 与对照组比较,敲低组炎症因子和干扰素的mRNA水平均上升,IFNγ的分泌水平上升,HCV的复制水平下降(P<0.05).与MOCK组比较,HCV组ADAR1在mRNA水平和蛋白水平均明显上升(P<0.05),但是,ADAR1的启动子活性没有明显变化(P>0.05).miRDB在线分析发现有多种潜在靶向ADAR1的miRNA.HCV感染Huh7细胞后,通过实时荧光定量PCR检测上述miRNA,与对照组比较,hsa-miR-613、hsa-miR-206、hsa-miR-135b-5p、hsa-miR-135a-5p、hsa-miR-6803-5p、hsa-miR-4530、hsa-miR-3915的表达水平均下降,差异有统计学意义(P<0.05).过表达上述miRNA后,与对照组比较,hsa-miR-135b-5p和hsa-miR-135a-5p能够在mRNA水平减少ADAR1的表达(P<0.05).与对照组比较,过表达hsa-miR-135a-5p或miR-135b-5p后,ADAR1的表达水平均下降(P<0.05)、IFNγ的分泌水平上升(P<0.05)、HCV的复制水平下降(P<0.05);与对照组比较,敲低hsa-miR-135a-5p或miR-135b-5p后,ADAR1的表达水平均上升,IFNγ的分泌水平下降,HCV的复制水平上升(P<0.05).结论 HCV感染后,Huh7细胞中hsa-miR-135a-5p和miR-135b-5p的表达水平下降,其靶向ADAR1 mRNA的3'端非编码区的水平下降,随后ADAR1的表达水平上升,抑制了宿主的先天免疫,促进了HCV的复制.