金线莲UGPase基因克隆与表达及在多糖合成中的作用

• 作者: 嵇元烨 吴梅 吴秋丽 江晴儿 谢晓鸿 孔向军 王忠华
• 来源期刊: 中草药
• 关键词: 金线莲 UGPase基因 克隆 荧光表达 酶活 相关性
• 年，卷（期）: 2021,（12）
• 所属期刊栏目: 药材与资源|Medicinal Materials
• 页码范围: 3671-3678
• 页数: 8页
• 分类号: R282.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2021.12.025

摘要

目的 克隆出金线莲Anoectochilus roxburghii尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UDP-Glucose pyrophoshorglase,UGPase)基因全长,并对其表达量及酶活性与多糖积累量之间的相关性进行分析,以研究UGPase基因在金线莲多糖合成代谢途径中的调控作用.方法 利用实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)技术和RACE(rapid-amplification of eDNA ends)技术克隆金线莲中UGPase基因序列;以金线莲尖叶、无纹等7个品种组培期及种植期茎段部位为材料,采用qRT-PCR、ELISA试剂盒法及苯酚-硫酸法分别测定UGPase基因表达量、酶活和多糖含量,并对其进行相关性分析.结果 克隆得到的序列全长1786 bp.开放阅读框为1425 bp,编码475个氨基酸.7个不同品种金线莲中UGPase基因表达量、酶活与多糖含量具有极显著正相关(相关系数分别为0.823、0.785).结论 成功克隆出金线莲UGPase全长基因,初步证明UGPase基因是参与金线莲多糖合成代谢的关键基因之一.