miRNA-124-3p靶向EZH2调控肝癌细胞转移和侵袭能力的机制研究

• 作者: 盛泳佳 韩晨阳 杨毅 周晓红 顾艳玲 王瑾
• 来源期刊: 浙江医学
• 关键词: miRNA-124-3p 肝癌 果蝇Zeste基因增强子人类同源物2 转移 侵袭
• 年，卷（期）: 2021,（13）
• 所属期刊栏目: 论著|Treatise
• 页码范围: 1381-1385,1399,后插1
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.12056/j.issn.1006-2785.2021.43.13.2020-4586

摘要

目的 探讨miRNA-124-3p靶向果蝇Zeste基因增强子人类同源物2(EZH2)调控肝癌细胞转移和侵袭能力的机制.方法 H22细胞分为Con组、mimic组、inhibitor组,mimic组和inhibitor组中分别转染miRNA-124-3p类似物mimic和抑制物inhibitor.实时荧光定量PCR法检测EZH2 mRNA表达水平.PI染色-流式细胞术检测细胞周期的变化,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室检测细胞转移和侵袭能力,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,免疫荧光法检测细胞EZH2的表达变化,Western blot法检测细胞中EZH2、细胞外因子1(wnt-1)和β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达水平.采用荧光素酶报告基因法验证miRNA-124-3p和EZH2的靶向关系.结果 与Con组比较,mimic组细胞EZH2蛋白和mRNA表达水平均下调,细胞24 h迁移率下降,转移细胞数、侵袭细胞数和克隆形成数均减少,EZH2的荧光强度下调,wnt-1和β-catenin蛋白表达水平均上调,差异均有统计学意义(均P<0.05).与Con组和mimic组比较,inhibitor组EZH2蛋白和mRNA表达水平均上调,细胞24 h迁移率上升,转移细胞数、侵袭细胞数和克隆形成数均增加,EZH2的荧光强度上调,wnt-1和β-catenin蛋白表达水平均下调,差异均有统计学意义(均P<0.05).荧光素酶报告基因结果显示miRNA-124-3p是EZH2的调控非编码RNA,miRNA-124-3p可以靶向结合EZH2.结论 miRNA-124-3p可以靶向抑制EZH2表达,下调wnt-1、β-catenin蛋白水平,改善肝癌细胞的转移和侵袭.