溶瘤腺病毒差异显示编码3-ZD55-精子相关抗原9对激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞的治疗效果

• 作者: 张洁 赵菁菁 张蕾 于海元 刘继海 毛立军
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 溶瘤腺病毒 前列腺癌
• 年，卷（期）: 2021,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1737-1740
• 页数: 4页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn421213-20201007-01355

摘要

目的:观察溶瘤腺病毒差异显示编码3(DD3)-ZD55-精子相关抗原9(SPAG9)在体外对激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞的治疗效果，并探讨作用机制。方法:将LNCaP细胞分为4组进行干预，分别为磷酸盐缓液组(PBS)、病毒对照组[ZD55-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)，10 MOI]、病毒治疗组(ZD55-SPAG9，10 MOI)、DD3启动子调控组(DD3-ZD55-SPAG9，10 MOI)。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活率；Transwell检测细胞迁移和侵袭能；蛋白质印迹法(Western blot)检测SPAG9、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和腺病毒早期区1A基因(E1A)的表达。多组之间采用方差分析，进一步组间比较采用SNK法。结果:CCK-8结果，DD3-ZD55-SPAG9组、ZD55-SPAG9组和ZD55-EGFP组LNCaP细胞存活率均显著低于PBS组[(73.80 1.43)%、(73.66 2.19)%、(81.79 2.59)%比100%， F＝1038.210， P<0.01]，ZD55-SPAG9组与DD3-ZD55-SPAG9组细胞存活率降低更为显著，但两者之间存活率差异无统计学意义( P>0.05)。Transwell迁移结果，DD3-ZD55-SPAG9组、ZD55-SPAG9组和ZD55-EGFP组小室底膜细胞数明显低于PBS组[(52.57±5.57)、(48.67±4.04)、(69.67±6.02)比(109.06±9.54)， F＝384.466， P<0.05]，ZD55-SPAG9组与DD3-ZD55-SPAG9组细胞迁移能力降低更为显著，且两者之间差异无统计学意义( P>0.05)。侵袭实验结果，DD3-ZD55-SPAG9组、ZD55-SPAG9组和ZD55-EGFP组穿透Matrigel胶，进入小室下层的细胞数目明显少于PBS组[(58.33±3.79)、(55.36±7.51)、(78.06±4.36)比(115.67±11.59)， F＝305.885， P<0.01]，提示细胞侵袭能力显著降低，ZD55-SPAG9组与DD3-ZD55-SPAG9组细胞侵袭能力降低更为显著。Western blot结果显示，与PBS组比较，DD3-ZD55-SPAG9组、ZD55-SPAG9组和ZD55-EGFP组内SPAG9蛋白表达下调[(0.32±0.07)、(0.47±0.09)、(0.66±0.05)比1， F＝594.522， P<0.01]，E-cadherin表达上调[(4.80±0.34)、(3.80±0.35)、(2.81±0.52)比1， F＝482.275， P<0.01]，Vimentin表达下调[(0.33±0.04)、(0.46±0.06)、(0.53±0.05)比1， F＝903.749， P<0.01]，MMP-2表达下调[(0.30±0.03)、(0.44±0.05)、(0.60±0.05)比1， F＝1 540.940， P<0.01]，上述变化在ZD55-SPAG9组与DD3-ZD55-SPAG9组内更为显著。WPMY-1细胞内E1A在DD3-ZD55-SPAG9组内的表达明显低于ZD55-SPAG9和ZD55-EGFP组。 结论:溶瘤腺病毒DD3-ZD55-SPAG9在体外可以有效降低LNCaP细胞的存活率，并抑制迁移和侵袭，并对正常细胞具有更高的安全性。