LINC01018介导E2F1-CDK6通路调控结肠癌发病的机制

• 作者: 陈宏伟 徐怡顺 陈渡 刘周静 王薇 张美连 潘冰洁
• 来源期刊: 中国医师杂志
• 关键词: 结肠肿瘤 RNA，长链非编码 LINC01018 细胞增殖 细胞迁移
• 年，卷（期）: 2021,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1832-1837
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn431274-20210608-00633

摘要

目的:研究LINC01018参与结肠癌发病的具体机制。方法:实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测结肠癌组织和细胞以及癌旁组织和细胞中LINC01018的表达差异情况。建立稳定过表达LINC01018的HT-29细胞株。利用RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验检测LINC01018与E2F1蛋白之间是否存在相互作用。利用双荧光素酶实验检测E2F1对CDK6启动子的调控作用。在过表达LINC01018的HT-29细胞中同时上调E2F1或CDK6表达，再通过CCK-8实验、Transwell实验、Western blot方法检测HT-29细胞的增殖、侵袭、迁移以及细胞中CDK6及MMP-2蛋白表达情况。结果:LINC01018在结肠癌组织及细胞中异常低表达。RIP实验结果显示，LINC01018与E2F1蛋白存在相互作用。双荧光素酶实验结果表明，E2F1蛋白能够增强CDK6启动子工作效率，E2F1对CDK6存在正调控作用；而LINC01018的过表达能够减弱E2F1对CDK6的正调控作用。回复实验显示，上调E2F1或CDK6表达能够减弱LINC01018过表达对HT-29细胞增殖、侵袭、迁移及CDK6、MMP-2蛋白表达的影响。结论:LINC01018在结肠癌组织及细胞中异常低表达。LINC01018可能通过E2F1/CDK6/MMP-2轴调控HT-29细胞增殖、侵袭及迁移，并参与结肠癌的发病。