白细胞介素33在肝细胞癌患者中的表达及其对CD8+T淋巴细胞功能的调节作用

• 作者: 王海鹏 刘屹 李东辉 沈光辉
• 学科: 医学
• 关键词: 癌,肝细胞 白细胞介素33 CD8阳性T淋巴细胞
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 肝脏肿瘤
• 页码范围: 117-123
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.01.018

摘要

目的 观察肝细胞癌(HCC)患者外周血白细胞介素33(IL-33)的变化，探讨IL-33对HCC患者CD8+T淋巴细胞的调节作用和可能机制。方法 选择2019年4月—2020年1月陕西省人民医院收治的44例HCC患者和20例健康对照者为研究对象。采集外周血，分离血浆和外周血单个核细胞(PBMC)，酶联免疫吸附试验检测血浆IL-33及其受体肿瘤抑制素2(ST2)的水平，实时定量PCR法检测PBMC中IL-33和ST2mRNA相对表达量。纯化CD8+T淋巴细胞，使用重组IL-33刺激培养，CCK-8法检测细胞增殖，酶联斑点吸附试验检测穿孔素和颗粒酶B分泌，流式细胞术检测程序性死亡受体-1(PD-1)、淋巴细胞活化基因-3(LAG-3)和细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA-4)表达，比较IL-33刺激前后细胞增殖、毒性分子分泌、免疫检查点分子的变化。CD8+T淋巴细胞与HepG2细胞共培养，通过检测乳酸脱氢酶表达计算CD8+T淋巴细胞诱导HepG2细胞死亡比例，比较IL-33刺激前后CD8+T淋巴细胞杀伤功能的变化。计量资料两组间比较采用t检验或配对t检验，相关性分析采用Pearson分析法。结果 HCC组血浆IL-33水平低于对照组[(269.80±63.08)pg/mLvs(339.50±64.43)pg/mL，t=4.072，P<0.001]，HCC组PBMC中IL-33mRNA相对表达量低于对照组(1.07±0.14vs2.45±0.87，t=10.250，P<0.001)。血浆ST2水平和PBMC中ST2mRNA相对表达量在HCC组和对照组之间的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。CD8+T淋巴细胞比例与血浆IL-33、ST2水平均无明显相关性(P值均>0.05)。HCC组CD8+T淋巴细胞分泌穿孔素、颗粒酶B的水平均低于对照组(P值均<0.05)，而HCC组CD8+T淋巴细胞中PD-1、LAG-3、CTLA-4阳性细胞比例均高于对照组(P值均<0.05)。重组IL-33刺激对两组CD8+T淋巴细胞增殖和免疫检查点分子表达均无显著影响(P值均>0.05)，但可促进穿孔素、颗粒酶B的分泌(P值均<0.05)。HCC组CD8+T淋巴细胞杀伤活性较对照组降低(P<0.05)，重组IL-33刺激可提升CD8+T淋巴细胞杀伤功能，主要表现为诱导HepG2细胞死亡比例升高(P<0.05)，IFNγ和TNFα分泌水平增加(P值均<0.05)。结论 HCC患者血浆IL-33水平降低。IL-33可通过促进穿孔素和颗粒酶B的分泌增强HCC患者CD8+T淋巴细胞杀伤活性，为HCC治疗提供新的靶点。