多房棘球蚴分泌物抗原对脂多糖诱导小鼠骨髓来源的树突状细胞表型及功能的影响

• 作者: 李文登 李超群 胡旺 徐凯 庞明泉 乜茹 冯浩杰 张占红 刘处处 樊海宁
• 学科: 医学
• 关键词: 棘球蚴病，肝 树突细胞 脂多糖类 免疫耐受
• 年，卷（期）: 2022,（3）
• 所属期刊栏目: 其他肝病
• 页码范围: 606-612
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.03.021

摘要

目的 探究不同浓度多房棘球蚴分泌物抗原(Em-sAg)对脂多糖(LPS)诱导小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDC)表型和功能的影响。方法 小鼠骨髓腔中所分离的骨髓前体细胞，经小鼠重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)刺激后形成BMDC，于正倒置显微镜下观察细胞形态。用流式细胞术鉴定BMDC纯度后，分为Control组、阳性对照组(LPS 1 μg/mL)、LPS+3mg/mL Em-sAg组、LPS+1.5mg/mL Em-sAg组、LPS+0.75mg/mL Em-sAg组、LPS+0.375mg/mL Em-sAg组共6组。流式细胞术检测各组BMDC表面分子(CD80、CD86、MHC-Ⅱ分子)的表达情况，ELISA法检测各组细胞因子IL-12p70的表达水平。满足正态分布的计量资料多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验表示。结果 在正倒置显微镜下观察到，培养8~10d的细胞可见毛刺样突起，细胞呈完全悬浮状态。流式细胞术检测发现，CD11c的阳性率均在70%以上，据此鉴定所培养的细胞大部分为BMDC。流式细胞术的进一步结果表明，与Control组相比，LPS组表面的细胞分子CD80、CD86、MHC-Ⅱ均显著增加(P值均<0.05)；与LPS组相比，LPS+3mg/mL Em-sAg组、LPS+1.5mg/mL Em-sAg组、LPS+0.75mg/mL Em-sAg组、LPS+0.375mg/mL Em-sAg组中BMDC的CD80显著减少(F=34.870，P<0.001)，CD86、MHC-Ⅱ无明显减少(P值均>0.05)。ELISA法的结果表明，不同组间的IL-12p70的水平差异均有统计学意义(F=73.140，P<0.05)，与Control组相比，LPS组刺激后IL-12p70的表达量显著升高，差异有统计学意义(P<0.05)；与阳性对照组相比，LPS+3mg/mL Em-sAg组、LPS+1.5mg/mL Em-sAg组、LPS+0.75mg/ml Em-sAg组、LPS+0.375mg/mL Em-sAg组均降低IL-12p70的表达量(P值均<0.05)，且Em-sAg浓度越高，降低促炎症因子IL-12p70表达量越明显。结论 不同浓度Em-sAg均可抑制LPS诱导的BMDC成熟度和促炎症细胞因子IL-12p70的表达。