壳聚糖兽用疫苗稀释液的制备及其应用

• 作者: 曹政 格格其木格 徐晓泉 翟少钦 付文贵 朱买勋
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 可溶壳聚糖 再生壳聚糖 疫苗稀释液 安全性 免疫原性
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 疫苗研究
• 页码范围: 4-10
• 页数: 7页
• 分类号: S859.79+7
• 语种: 中文

摘要

目的 建立一种壳聚糖稀释液的制备方法,并制备一种生物相容性较好、安全性高、可有效提高疫苗免疫效果的兽用疫苗稀释液,以用于草原牧区大规模动物免疫.方法 在酸性条件下溶解壳聚糖,向上清中滴加NaOH使已溶解的可溶壳聚糖析出,制备再生壳聚糖.用不同pH的0.2 mol/L磷酸-柠檬酸缓冲液、醋酸-醋酸钠缓冲液和磷酸盐缓冲液配制1％～5％的壳聚糖以及再生壳聚糖溶液,并在115℃条件下湿热灭菌.通过溶解特性以及外观等条件筛选最佳缓冲体系.利用不同浓度的可溶壳聚糖稀释液(soluble chitosan diluent,SCD)及再生壳聚糖稀释液(regenerated chitosan diluent,RCD)稀释山羊痘活疫苗,通过免疫山羊后的安全性及ELISA抗体水平筛选最佳稀释液配方,并建立最佳稀释液的制备流程.利用制备的稀释液稀释山羊痘活疫苗及猪瘟活疫苗并免疫动物,检测制备的稀释液的安全性及免疫增强作用.结果 筛选得到的最佳稀释液配方及其制备过程为:0.2 mol/L pH 4.0醋酸-醋酸钠缓冲液配制3％浓度的壳聚糖溶液,离心去除杂质后,上清滴加NaOH至沉淀完全析出;收集再生壳聚糖,用0.2 mol/L pH 4.6醋酸-醋酸钠缓冲液配制成2％浓度的再生壳聚糖溶液,115℃湿热灭菌30 min;用1 mol/L无菌醋酸钠溶液调pH至6.0并稀释至终浓度0.5％,即为0.5％ pH 6.0的RCD.使用该稀释液配制疫苗,仅免疫1次即可达到其他稀释液配制疫苗免疫2次后的抗体水平,免疫增强作用高于铝胶稀释液,同时具备与生理盐水一致的安全性.结论 本研究利用再生壳聚糖制备了性状优良、pH接近中性、生物相容性好的兽用疫苗稀释液.基于壳聚糖良好的抗原吸附及缓释特性,稀释液可在疫苗注射剂量不足的情况下达到理想的免疫效果,较为适合大规模动物免疫时使用.