烟酰胺单核苷酸(NMN)对小鼠C2C12细胞成肌分化的影响

• 作者: 沈龙仙 王丽婷 汪涵 杨松柏 李向臣 赵阿勇 周晓龙
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 烟酰胺单核苷酸(NMN) C2C12细胞 成肌分化 肌肉特异性基因
• 年，卷（期）: 2022,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告|Articles and Letters
• 页码范围: 695-703
• 页数: 9页
• 分类号: S835
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2022.04.008

摘要

烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)具备多种生物学功能,对心脑疾病、老年退行性疾病、神经退行性疾病、抗衰老等具有治疗作用.经NMN处理后的骨骼肌对衰老相关的转录变化有显著的预防作用,但NMN对骨骼肌增殖分化有何作用尚不明确.为深入了解NMN对细胞成肌分化的影响、丰富肌肉生长发育的机制,本研究以小鼠(Mus musculus)成肌细胞(mouse myoblasts)C2C12为模型,将不同浓度的NMN(0,0.1,1和2μg/mL)应用于2％马血清(horse serum,HS)诱导分化的C2C12.采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测NMN处理后C2C12细胞的活力;通过2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(2',7'-dichlorodi-hydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)和四氯四乙基苯并咪唑碳菁碘(5,5',6,6'-tetrechloro-1,1',3,3'-tetraethyl benzimidazol carbocyanine iodide,JC-1)两种荧光探针,分别对细胞进行染色,检测NMN对C2C12细胞线粒体膜电位和活性氧(reactive oxygen species,ROS)的影响;利用Western blot及免疫荧光技术检测肌细胞分化标记因子肌生成素(myogenin,MyoG)、肌分化因子1(myogenic differentiation 1,MyoD1)表达和肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MYH)的蛋白表达水平.结果显示,0、0.1、1和2μg/mL的NMN对C2C12细胞没有毒性作用,并且一定浓度的NMN在一定时间内可以促进细胞活力,提高线粒体膜电位,上调成肌分化相关蛋白MyoG、MyoD1和MYH的表达.上述研究结果表明,一定浓度的NMN在一定时间内可以促进C2C12细胞成肌分化.本研究丰富了NMN的生理作用,为后续NMN在畜牧产业的应用提供新的参考基础.